新型香豆素磺酰腙衍生物CBSH的合成及其通过抗菌与促愈双机制加速皮肤创面修复的研究

这篇研究报道了新型化合物N′-(1-(7-羟基-2-氧代-2H-色烯-3-基)亚乙基)-4-甲基苯磺酰肼（CBSH）的合成与生物学评价。该研究通过体外实验证实CBSH对MRSA（MIC 50 μg/mL）等耐药菌株具有显著抗菌活性，体内实验显示其可促进成纤维细胞迁移（迁移率82.5%）并加速大鼠伤口闭合（14天愈合率97.8%）。分子对接揭示其与COX-2（结合能-8.706 kcal/mol）等伤口愈合关键靶点的稳定相互作用，为开发兼具抗感染和促修复功能的创面敷料提供了新思路。

　　

化学合成与表征

研究团队通过Knoevenagel缩合反应，将2,4-二羟基苯甲醛与乙酰乙酸乙酯在哌啶催化下合成3-乙酰基-7-羟基-2H-色烯-2-酮（3），再与对甲苯磺酰肼缩合获得目标化合物CBSH（收率82%）。核磁共振（¹H-NMR）显示特征峰：δ 2.35（Ar-CH₃），6.69（H₈），10.73（OH），质谱确认分子量372.40。红外光谱检测到关键官能团振动：3326 cm^-1（OH）、1687 cm^-1（内酯C=O）和1614 cm^-1（C=N）。

抗菌效能评估

采用琼脂杯扩散法发现CBSH对革兰阳性菌（B. cereus）和阴性菌（CRPA）均具抑制活性，MIC值显著优于氨苄青霉素（>100 μg/mL）。特别对MRSA的MIC（50 μg/mL）低于头孢拉定（>100 μg/mL），且通过CFU法验证其杀菌效果。值得注意的是，母体化合物3对MRSA无活性（MIC>100 μg/mL），证实磺酰腙结构修饰对增强抗菌性能的关键作用。

细胞迁移促进机制

在划痕实验中，12.5 μg/mL CBSH处理24小时后，人成纤维细胞（BJ）迁移率达82.5%，较对照组（71%）显著提升。这与已报道的香豆素糖苷（如peltatamarin A）促迁移效果相当，暗示其可能通过调节胶原I和纤维连接蛋白表达加速伤口再上皮化。

动物模型验证

大鼠全层皮肤缺损模型显示，CBSH治疗组14天伤口闭合率达97.8%，组织学分析可见完整表皮再生和松散胶原纤维排列。Masson染色显示治疗组真皮层新生血管形成（箭头指示），而对照组仍存在微脓肿和中性粒细胞浸润。这种促愈效果与7-甲氧基-4-甲基香豆素（MMC）的报道相似，但CBSH兼具更优的抗菌特性。

分子作用机制解析

反向对接筛选发现CBSH与COX-2结合能（-8.706 kcal/mol）高于TNF-α（-8.506 kcal/mol）和5-LOX（-8.127 kcal/mol）。关键相互作用包括：与Arg120的氢键、与Trp100的π-烷基作用，以及和Val349的π-σ作用——该残基正是罗非昔布（rofecoxib）的结合位点。100 ns分子动力学模拟显示，CBSH-COX-2复合物骨架RMSD稳定在0.1497 nm，证实结合稳定性。

应用前景展望

该研究创新性地将香豆素抗菌模块、磺胺药效团和席夫碱结构整合，开发的CBSH化合物具有三重优势：① 突破性抗菌谱覆盖MRSA和CRPA等耐药菌；② 通过COX-2/5-LOX双通路调控炎症微环境；③ 促进成纤维细胞迁移和血管新生。这种"抗感染-促修复"协同机制为慢性伤口敷料开发提供了新策略，尤其适用于糖尿病足溃疡等难愈性创面。