《Farmacia Hospitalaria》：Extended Ovarian Transport for Centralized Tissue Cryobanking: Impact on Primordial Follicle Integrity
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本研究评估卵巢组织运输时间对原始卵泡完整性的影响。通过检测凋亡（AC3）、DNA损伤（γH2AX）和缺氧（HIF-1α），发现运输超过21小时后原始卵泡凋亡显著增加，但DNA损伤和缺氧不相关。结论表明，运输时间在21小时内对原始卵泡安全，但之后凋亡增加可能与DNA损伤有关。
Murat Erden|Soner Celik|Wengelawit Molla|Na-Young Rho|Kutluk H. Oktay
美国康涅狄格州纽黑文市耶鲁大学医学院妇产科与生殖科学系
摘要
目的
评估卵巢组织运输对人类原始卵泡完整性的影响，特别是在皮质组织冷冻保存之前。
研究对象
来自16名个体的整个卵巢（n=13）或卵巢皮质（n=3），包括10名已故器官捐赠者和6名正在接受临床卵巢组织冷冻保存的患者。这些组织被用适当的培养基运输到我们的中心进行冷冻保存。在临床组中，患者接受卵巢组织冷冻保存的指征包括高级别浆液性卵巢癌、子宫内膜异位症和霍奇金淋巴瘤。
暴露因素
运输时间是指从器官捐赠者的组织阻断时间，以及患者的卵巢切除或卵巢组织取出时间，直到卵巢组织被冷冻保存的时间。
主要结果指标
通过检测抗活性半胱天冬酶-3（AC3）、γH2AX和缺氧诱导因子1-α（HIF-1α）的免疫染色来评估卵泡和基质细胞的凋亡、卵母细胞DNA损伤以及组织缺氧情况。卵泡激活情况通过原始卵泡生长启动指数（PFGII）进行评估，该指数定义为初级/原始卵泡的比例。
结果
原始卵泡的AC3（凋亡死亡）和γH2AX（DNA损伤）染色强度随着运输时间的延长而显著增加（相关系数分别为4.22，95%置信区间：0.26–8.17，p=0.038；以及0.73，95%置信区间：0.26–1.45，p=0.045），而原始卵泡密度和PFGII未受到影响。阈值分析显示，20.58小时和3.15小时分别是凋亡死亡和DNA损伤的临界运输时间。然而，通过γH2AX染色强度半定量检测到的DNA损伤程度较轻。此外，基质细胞中的HIF-1α和AC-3表达水平以及基质细胞密度与运输时间无相关性，这表明缺氧或基质细胞损伤并非卵泡损伤的潜在机制。
结论
卵巢组织在运输21小时内其完整性不受影响。运输时间超过21小时后原始卵泡凋亡显著增加，这似乎并非由于组织缺氧、基质细胞损伤或生长激活增强所致。尽管DNA损伤程度较轻，但增加的DNA损伤可能部分导致了原始卵泡的凋亡。
