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枯草芽孢杆菌发酵美洲大蠊残渣替代鱼粉对大口黑鲈幼鱼生长、代谢及肠道健康的影响
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年08月08日 来源:Aquaculture Reports 3.7
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为解决水产饲料中鱼粉资源短缺问题,研究人员开展枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵美洲大蠊(Periplaneta americana)残渣(FACR)替代鱼粉的研究。通过9周饲喂实验发现,15%替代组显著提升大口黑鲈(Micropterus salmoides)幼鱼的粗蛋白含量、消化酶活性及免疫指标,同时优化肠道菌群结构。该研究为昆虫蛋白资源化利用及可持续水产饲料开发提供科学依据。
随着全球水产养殖业规模扩大,传统鱼粉资源因过度捕捞和环境压力面临严重短缺,价格持续攀升。与此同时,水产饲料中鱼粉占比高达40-50%,成为制约产业可持续发展的瓶颈。昆虫蛋白因其高营养价值和环境友好特性被视为理想替代品,但昆虫外骨骼中的几丁质等抗营养因子限制了其应用。美洲大蠊(Periplaneta americana)作为传统中药材,其乙醇提取后的残渣含有63%粗蛋白和22%粗脂肪,但当前多被焚烧处理,造成资源浪费。如何通过生物技术手段提升昆虫蛋白利用率,成为水产营养学研究的热点问题。
大理大学农学与生物科学学院的研究团队在《Aquaculture Reports》发表论文,系统评估了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵美洲大蠊残渣(FACR)替代鱼粉对大口黑鲈(Micropterus salmoides)幼鱼生长性能、生理代谢及肠道健康的影响。研究通过正交实验优化发酵工艺(96小时/37°C/6%接种量/80%含水量),使几丁质含量从10.31%降至4.09%,并制备5种等氮等脂饲料(0%、15%、30%、45%、60%替代水平),进行为期9周的养殖实验。
关键技术包括:发酵工艺优化(L9(34)正交设计)、生长性能测定(体重增重率WGR、特定生长率SGR等)、生化指标检测(血清ALT/AST、肝脏TG/T-CHO等)、肠道形态学分析(绒毛宽度/隐窝深度)以及16S rRNA测序(V4区扩增,Illumina MiSeq平台)。
3.1 存活率与生长性能
45%和60%替代组终末体重(FBW)和增重率(WGR)显著低于对照组(P<0.05),而15%替代组与对照组无差异。饲料转化率(FCR)在低替代组(0-30%)显著优于高替代组,表明适度替代不影响生长效率。
3.2 鱼体成分与氨基酸组成
45%替代组全鱼粗蛋白含量最高(18.12% vs 对照组17.34%),但60%替代组必需氨基酸(EAA)占比(TEAA/TAA)显著提升至0.434。这表明发酵有效释放了昆虫蛋白的营养潜力。
3.3 消化酶活性
15%替代组肠道胰蛋白酶活性达474.99 U/mg蛋白,显著高于对照组(324.61 U/mg),而60%替代组α-淀粉酶活性降至0.09 U/mg(对照组0.15 U/mg),显示FACR对碳水化合物消化的抑制作用。
3.4 代谢指标
血清总蛋白(TP)在45%替代组达峰值42.16 g/L,而30%替代组尿素氮(UN)最低(10.09 mmol/L vs 对照组13.32 mmol/L)。肝脏葡萄糖(GLU)随替代水平升高而增加,60%组达7.86 mmol/g蛋白,提示FACR可能影响糖代谢。
3.5 抗氧化与免疫
15%替代组血清补体C3(501.61 μg/mL)和IgM(767.56 μg/mL)显著升高,而60%组肝脏过氧化氢酶(CAT)活性降至80.59 U/mg(对照组135.96 U/mg),表明高替代水平可能引发氧化应激。
3.6 肠道形态与菌群
30%替代组绒毛宽度最宽(126.71 μm),但60%组微生物多样性(Shannon指数)显著降低。PCA分析显示FACR组菌群结构与对照组分离,以 Fusobacteria(57.3%)和 Cetobacterium(49.2%)为优势菌属。
该研究证实,15%鱼粉替代水平在维持大口黑鲈生长性能的同时,可提升蛋白质沉积率(粗蛋白+4.5%)、增强免疫力(IgM+33.4%)并优化肠道健康。发酵工艺有效降低几丁质含量(-60.2%)是关键突破,而高替代组(>30%)出现的消化酶抑制和菌群紊乱提示需控制添加比例。研究成果为昆虫蛋白资源化利用提供了技术范式,对推动水产饲料行业可持续发展具有重要意义。
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