树突细胞缺失诱导小鼠自身免疫性胆管疾病：模拟人类原发性胆汁性胆管炎的血清学与病理学模型

这篇研究揭示了树突细胞（DCs）在维持免疫耐受中的关键作用，通过构建CD11c-Cre; Rosa26-DTA（ID）小鼠模型，首次证实DCs缺失可诱发与人类原发性胆汁性胆管炎（PBC）高度相似的自身免疫性胆管损伤。研究发现ID小鼠呈现CD4+ T细胞主导的门脉炎症、抗PDCE-2抗体升高及胆管进行性消失，并通过血清过继转移实验证明抗PDCE-2抗体是驱动胆管炎的关键效应分子。该研究为PBC发病机制提供了新型动物模型和理论依据。

　　

ABSTRACT

树突细胞（DCs）作为抗原呈递细胞在免疫调节中发挥核心作用，其功能紊乱与自身免疫疾病密切相关。本研究通过杂交CD11c-Cre与Rosa26-DTA小鼠构建DCs缺失的ID模型，发现其可自发产生与人类原发性胆汁性胆管炎（PBC）高度相似的血清学和病理学特征。

Methods

采用HE染色、流式细胞术（FCM）和免疫组化（IHC）评估肝胆病变，通过qPCR和RNA测序分析肝脏基因表达。通过ELISA检测抗线粒体抗体（AMAs）和IFN-γ水平，并建立野生型小鼠血清过继转移（IP）模型验证抗体致病性。

Results

ID小鼠表现为显著的门脉区炎症浸润，以中性粒细胞和CD4⁺/CD8⁺ T淋巴细胞为主。血清AMAs水平较对照组升高1.8倍，肝脏中TNF-α、IFN-γ、IL-2等炎症因子基因表达上调。IP模型显示ID血清可在10天内诱发以CD4⁺ T细胞为主的胆管炎，而清除抗PDCE-2抗体后炎症显著减轻。

Conclusions

DCs缺失通过激活CD4⁺ T细胞和促发抗PDCE-2抗体产生，导致PBC样胆管损伤。ID和IP模型证实T细胞应答与自身抗体是PBC发病的双重关键因素。

3.1 Effective Depletion of DCs in ID Mice

流式与免疫组化证实ID小鼠肝脏和脾脏中CD11b⁺CD11c⁺ DCs比例显著降低，胆管周围DCs几乎完全缺失。

3.2 Severe Inflammatory Infiltration Around Bile Ducts

ID小鼠出现体重下降和胆囊扩张，16周龄时门脉区炎症达峰值，浸润细胞包含CD45⁺、CD3⁺、MPO⁺中性粒细胞及B220⁺ B细胞。

3.3 Th1 Polarization in ID Mice

肝脏CD4⁺ T细胞比例显著高于CD8⁺亚群，且IFN-γ⁺细胞占比增加4.2倍，血清IFN-γ水平同步升高，提示Th1型免疫优势应答。

3.5 Autoantibodies and Liver Injury Markers

ID小鼠血清AMAs和ALT分别升高1.8倍和2.5倍，但碱性磷酸酶（ALP）无显著变化，反映肝细胞损伤而非单纯胆汁淤积。

3.7-3.8 PDCE-2-Specific Autoantibodies

ELISA检测显示ID血清中PDCE-2抗体水平较对照组高130倍，免疫组化证实该抗体特异性靶向胆管上皮细胞。

3.9 Serum Transfer Model Validation

IP-ID小鼠出现CD4⁺ T细胞为主的胆管浸润和ALP升高，而清除PDCE-2抗体的血清则失去致病性，直接证实该抗体的核心作用。

3.10 Transcriptomic Signatures

RNA-seq分析发现ID小鼠肝脏中574个基因上调，248个下调，干扰素-γ应答、白细胞迁移等通路显著富集，与Th1免疫特征高度吻合。

4 Discussion

该研究首次建立DCs缺失诱发的PBC动物模型，揭示DCs通过调控CD4⁺ T细胞分化和自身抗体产生维持胆管免疫稳态。ID模型再现了人类PBC从早期炎症到晚期胆管消失的全病程特征，而IP模型则创新性地分离出抗PDCE-2抗体的独立致病作用。尽管存在中性粒细胞浸润显著等物种差异，该研究为靶向DCs或PDCE-2的精准治疗策略提供了理论支撑。