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基因组学与代谢组学辅助解析贝莱斯芽孢杆菌D83的生防促生机制及其农业应用潜力
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年08月07日 来源:Microbiology Spectrum 3.8
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本研究通过基因组学和代谢组学技术揭示了贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)D83的多重功能:广谱抑制8种植物病原真菌(如茄腐镰刀菌Fusarium oxysporum),并通过产吲哚乙酸(IAA)、固氮、溶磷等特性显著促进玉米和烟草生长(较市售菌剂效果提升30%)。全基因组测序(3.9 Mb,GC含量46.5%)鉴定出丰产素(fengycin)、表面活性素(surfactin)等12个次级代谢产物合成基因簇,LC-MS/MS证实其分泌抗菌代谢物和植物激素,为开发生物农药和绿色菌肥提供新资源。
贝莱斯芽孢杆菌D83的分离与功能鉴定
从三七(Panax notoginseng)连作土壤健康植株根际分离的D83菌株,经16S rRNA鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。平板对峙实验显示其对茄腐镰刀菌(Fusarium oxysporum)、立枯丝核菌(Sclerotium rolfsii)等8种病原真菌抑制率达61.79%-88.11%,挥发性有机物(VOCs)抑制率为37.25%-79.88%,表明其具备双重抗菌机制。
促生长特性与盐胁迫适应性
D83在CAS培养基上形成橙色晕圈(铁载体阳性),可溶解无机/有机磷,分泌IAA(Salkowski法检测)和纤维素酶。13% NaCl浓度下仍能生长,凸显其盐碱地应用潜力。盆栽试验中,D83处理使玉米种子发芽率提升至95%(对照85%),烟草幼苗生物量增加2.3倍,叶片过氧化氢酶(CAT)活性显著升高(P<0.01),丙二醛(MDA)含量降低,表明其增强植物抗逆性。
基因组解析与次级代谢潜力
PacBio测序获得3,929,757 bp环状染色体,预测3,987个编码基因。antiSMASH分析发现12个次级代谢基因簇,包括100%同源的表面活性素(srfAB)、丰产素(fenB)和地非西丁(difficidin)合成簇。PCR扩增验证了ituD(iturin合成酶)和yndJ(未知蛋白)等关键基因存在。系统发育树显示D83与已知生防菌FZB42聚枝,支持其功能保守性。
代谢组学的化学武器库
LC-MS/MS鉴定2,648种代谢物,包括抗生素纳他霉素(Natamycin)和植物激素IAA。值得注意的是,虽基因组预测到bacillaene合成簇,但培养条件下未检测到该物质,推测需特定诱导条件。与市售菌剂(含枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis)相比,D83发酵液使玉米根鲜重增加45%(P<0.001),凸显其制剂开发价值。
农业应用展望
D83的多重功效(生防+促生+耐盐)使其成为可持续农业的理想候选。后续需开展田间试验验证其防控三七根腐病的实效,并通过添加前体物质(如L-色氨酸)激活沉默基因簇,进一步提升代谢物产量。该研究为设计新型微生物肥料提供了分子靶点和菌种资源。
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