BCR::ABL1阴性骨髓增殖性肿瘤中JAK2突变通过IFN-γ信号通路重塑骨髓微环境并影响患者预后的机制研究

本研究针对BCR::ABL1阴性骨髓增殖性肿瘤(MPN)中JAK/STAT通路持续激活但IFN-γ信号与肿瘤微环境(TME)关联不明的问题，通过分析265例患者骨髓活检样本及JAK2 V617F突变细胞系，首次揭示JAK2突变驱动IFN-γ信号通路内源性激活，导致淋巴细胞浸润增加并形成预后良好的免疫簇。该发现为MPN免疫治疗提供新靶点，发表于《Leukemia》。

　　

在血液系统肿瘤领域，BCR::ABL1阴性的骨髓增殖性肿瘤(MPN)一直备受关注。这类疾病包括真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)和原发性骨髓纤维化(PMF)，其共同特征是JAK/STAT信号通路的持续激活。虽然JAK抑制剂(JAKi)的应用改善了部分患者的预后，但疾病进展为继发性急性髓系白血病(sAML)的风险仍然存在。更令人困惑的是，临床上观察到携带JAK2 V617F突变的患者往往表现出独特的免疫特征，这提示肿瘤细胞与微环境之间可能存在尚未阐明的相互作用机制。

德国马丁路德大学哈勒-维滕贝格大学医院的研究团队在《Leukemia》发表的重要研究，首次系统揭示了JAK2突变通过内源性激活干扰素γ(IFN-γ)信号通路，重塑骨髓微环境并影响患者预后的完整机制。研究人员整合了265例MPN患者骨髓活检、JAK2 V617F突变细胞系实验和公共数据库分析，采用免疫组化(IHC)、多光谱成像(MSI)、单细胞RNA测序(scRNAseq)和基因集富集分析(GSEA)等技术，发现JAK2突变可独立于IFN-γ配体直接激活下游信号通路，导致STAT1磷酸化增加和IRF1表达上调。

主要技术方法

研究建立了包含265例MPN患者和50例健康对照的骨髓活检队列，通过免疫组化检测pJAK2、pSTAT1等蛋白表达，采用多光谱成像分析肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的空间分布，结合单细胞RNA测序解析细胞特异性IFN-γ信号激活模式，并利用公共数据库(GSE53482等)进行验证。体外实验使用JAK2 V617F突变的HEL和SET-2细胞系，通过Western blot和RNAseq分析信号通路激活状态。

JAK2突变驱动IFN-γ信号通路内源性激活

研究发现JAK2 V617F突变的HEL和SET-2细胞系虽不分泌IFN-γ，却表现出pSTAT1、IRF1等下游分子的持续激活。在患者样本中，JAK2突变组pSTAT1表达显著高于CALR突变组(图1N-P)，且与突变等位基因频率呈正相关趋势(图4M-P)。公共数据库分析证实，MPN患者CD34⁺细胞中IFN-γ响应基因显著富集(图1Q)。

骨髓微环境免疫特征重塑

多光谱成像显示JAK2突变患者骨髓中CD8⁺ T细胞、调节性T细胞(Tregs)和CD163⁺巨噬细胞浸润增加(图2B-E，表3)。单细胞测序揭示IFN-γ信号在单核细胞中特异性上调(图3D-F)，而免疫组化显示pSTAT1主要在CD45⁺CD3⁺ T细胞中高表达(图3H-K)。

预后相关的免疫簇特征

无监督聚类鉴定出两个特征性免疫簇：预后良好的C2簇以高IFN-γ信号、高TILs浸润和低骨髓纤维化为特征，且富集JAK2突变和JAKi初治患者(图4A-F，图5F-J)。多因素分析证实TILs数量是独立预后因素(图6E)。

免疫检查点分子异常表达

MPN样本中HLA-I经典分子表达降低而HLA-G升高，免疫检查点分子CTLA4、LAG3等表达增加(图6A-C)。值得注意的是，高HLA-F表达与不良预后相关，这为免疫治疗靶点选择提供了新线索。

这项研究首次系统阐明了JAK2突变通过内源性激活IFN-γ信号通路重塑骨髓免疫微环境的机制，并鉴定出具有临床预后价值的免疫特征簇。发现不仅解释了JAK2突变患者独特的免疫表型，还为MPN的精准免疫治疗提供了理论依据：针对IFN-γ信号通路与免疫检查点的联合干预策略，可能成为改善JAK2突变患者预后的新方向。特别是研究中发现的预后良好免疫簇特征，未来或可用于指导治疗决策和疗效预测。