黏膜疫苗MV130通过调控变应原免疫应答预防嗜酸性粒细胞性过敏性气道炎症

本研究针对过敏性哮喘这一重大公共卫生问题，开发了黏膜疫苗MV130。研究人员通过小鼠HDM诱导的嗜酸性粒细胞性气道炎症模型，证实MV130能有效预防变应原致敏，抑制Th2/ILC2介导的2型免疫反应，减少iEos浸润但保留rEos稳态功能。该疫苗通过重编程DCs的转录组和代谢特征（增强糖酵解/降低OXPHOS），诱导Th1/IL-10优势应答，且保护效果可持续9周。研究为哮喘预防提供了新型黏膜免疫干预策略，具有重要临床转化价值。

　　

过敏性哮喘作为全球范围内影响约4亿人口的慢性炎症性疾病，其中2型（T2）免疫介导的嗜酸性粒细胞性哮喘是最常见的亚型。尽管糖皮质激素和生物制剂已应用于临床，但哮喘的预防和重症管理仍面临巨大挑战。当前研究焦点集中在如何模拟"农场保护效应"——即早期微生物暴露对过敏性疾病发生的预防作用，而多细菌制剂（PBPs）因其兼具抗病毒感染和免疫调节双重潜力备受关注。

在这项发表于《Nature Communications》的研究中，来自西班牙马德里康普顿斯大学（Universidad Complutense de Madrid）的Carmen Sevilla-Ortega等研究人员，对黏膜疫苗MV130——一种由6种灭活细菌组成的多菌体制剂（含60%肺炎链球菌和15%金黄色葡萄球菌等）——在过敏性气道炎症中的保护机制进行了系统探究。研究团队通过构建屋尘螨（HDM）诱导的小鼠哮喘模型，结合人类树突状细胞（DCs）实验，揭示了MV130通过重编程免疫应答预防哮喘的全新机制。

关键技术方法包括：建立HDM致敏/攻击的小鼠哮喘模型（含气道高反应性检测）；流式细胞术分析肺组织iEos（Siglec-F^highCD101^high）和rEos（Siglec-F^intCD101^low）亚群；体外培养健康人群和哮喘患者来源的单核细胞源性DCs（HmoDCs）；采用Seahorse能量代谢分析仪检测糖酵解质子外排率（glycoPER）；通过基因集富集分析（GSEA）解析转录组特征；以及骨髓源性DCs（BMDCs）过继转移实验验证关键机制。

研究结果部分：

MV130阻断HDM诱导的关键哮喘病理特征

实验数据显示，MV130处理显著降低血清总IgE和HDM特异性IgE/IgG1水平（p<0.0001），减少支气管周围炎性浸润和BALF中嗜酸性粒细胞（iEos）数量（从HDM组的45%降至15%）。通过全身体积描记法和侵入式肺功能检测，证实MV130可逆转气道高反应性（AHR），使增强间歇（Penh）和阻力指数（RI）恢复至基线水平（p<0.01）。组织学分析显示，MV130还显著抑制α-SMA⁺平滑肌增厚（减少62%）和PAS⁺杯状细胞增生。

MV130选择性抑制iEos而不影响rEos

通过MBP染色和流式分析发现，MV130仅减少支气管周围CD62L^low的炎症性嗜酸性粒细胞（iEos）（p<0.001），而对肺实质中CD62L⁺的稳态嗜酸性粒细胞（rEos）无影响。EPX活性检测证实，MV130处理组的活化iEos数量较HDM组降低3倍（p<0.01），且BALF中EPX活性同步下降（p<0.05）。

MV130重建气道非病理免疫应答

在免疫机制方面，MV130增加肺组织IFN-γ⁺ T细胞（从5%升至15%）和FOXP3⁺ Treg（从3%升至7%），同时抑制IL-5⁺ Th2细胞（从12%降至4%）和IL-5/IL-13⁺ ILC2s（减少60%）。值得注意的是，IL-5⁺ T细胞比例与iEos数量呈显著正相关（r=0.82），而IFN-γ⁺ T细胞则呈负相关（r=-0.75）。MV130还降低MLN中CD23⁺迁移性DCs比例（从35%降至15%），并修复ZO-1/occludin表达，使BALF中白蛋白和LDH水平恢复正常。

MV130预防效果持续9周

在预防性实验中，MV130预处理（3天/周×2周）后休息9周再进行HDM攻击，仍能显著抑制IgE致敏（降低70%）和气道嗜酸性粒细胞浸润（减少80%），表明其诱导的免疫记忆具有长期保护性。

人类DCs的转录组与代谢重编程

GSEA分析显示，MV130激活人类DCs中TNF-α/IFN-γ/IL-6/IL-10信号通路，同时富集糖酵解相关基因（如HALLMARK_GLYCOLYSIS）。Seahorse检测证实MV130+HDM处理的DCs糖酵解活性比HDM单独处理高2倍（p<0.01），而线粒体膜电位/质量比降低40%（p<0.05）。在功能上，MV130使健康供体和哮喘患者DCs产生的Th1/IL-10细胞比例增加3倍，同时抑制HDM诱导的Th2极化（IFN-γ/IL-5比值提高5倍）。

MyD88依赖的DCs保护机制

过继转移实验证明，MV130处理的野生型BMDCs可预防HDM致敏（IgE降低65%），但MyD88^-/- BMDCs失去保护作用。机制研究表明，MV130通过MyD88依赖性途径上调CD40表达（增加3倍）并促进TNF-α/IL-6/IL-10产生，而RIPK2抑制剂Gefitinib仅部分阻断此效应。

这项研究首次系统阐明了黏膜疫苗MV130通过调控DCs功能预防过敏性哮喘的多层次机制：在分子水平上重编程转录组和代谢特征（糖酵解/OXPHOS转换）；在细胞水平上平衡Th1/Th2/Treg应答；在组织水平上选择性抑制iEos浸润而不影响rEos稳态功能。特别值得注意的是，MV130产生的保护效果可持续9周，且对已确诊的哮喘患者DCs仍具有调节作用，这为其临床转化提供了重要依据。研究不仅为理解微生物-免疫互作在过敏性疾病中的保护作用提供了新视角，更开创了"训练免疫为基础疫苗"（Trained Immunity-based Vaccine, TlbV）在哮喘预防领域的新应用范式。未来研究可进一步探索MV130在不同哮喘内型中的适用性，以及与其他免疫调节策略的协同效应。