NXF1通过调控SRSF3介导的SP4可变剪接抑制子宫内膜癌进展

本研究针对晚期子宫内膜癌(ECa)化疗耐药和转移难题，揭示了核RNA输出因子NXF1通过干扰剪接因子SRSF3与SP4外显子3的结合，抑制促癌长亚型L-SP4生成并促进抑癌短亚型S-SP4形成的新机制。研究人员通过临床样本分析、小鼠模型和分子生物学实验证实，NXF1低表达与ECa不良预后显著相关，其过表达可抑制肿瘤增殖转移，为ECa提供了新的预后标志物和治疗靶点。

　　

子宫内膜癌(Endometrial cancer, ECa)作为妇科常见恶性肿瘤，其发病率随人口老龄化和肥胖率上升持续攀升。尽管早期患者通过手术可获得较好预后，但晚期ECa的5年生存率骤降至20%-26%，且传统治疗常因化疗耐药和复发转移受限。这种临床困境背后，是ECa分子机制的复杂性——特别是RNA可变剪接(Alternative splicing)异常在肿瘤进展中的作用尚未充分阐明。

荆楚理工学院附属荆门市中心医院（Jingmen Central Hospital Affiliated to Jingchu University of Technology）的Nan Meng团队在《iScience》发表的研究，首次揭示了核RNA输出因子NXF1通过调控SP4基因的可变剪接抑制ECa进展的分子机制。研究人员整合TCGA临床数据分析、体内外功能实验和RNA-seq技术，发现NXF1通过与剪接因子SRSF3相互作用，干扰其对SP4外显子3的识别，从而抑制促癌亚型L-SP4生成，促进缺乏转录激活域的抑癌亚型S-SP4形成。

研究采用TCGA数据库预后分析、免疫组化检测临床样本、构建基因过表达/敲除细胞模型，并结合裸鼠移植瘤实验验证表型。关键实验技术包括RNA亲和纯化验证蛋白-RNA互作、紫外交联免疫沉淀(CLIP)分析结合位点、分子对接预测关键氨基酸残基，以及RNA-seq全转录组剪接图谱分析。

NXF1低表达与ECa不良预后相关

TCGA数据分析显示，NXF1高表达组患者的死亡率和复发率显著降低（图1A-D）。70例ECa组织芯片检测证实，NXF1蛋白在II/III期肿瘤中表达显著低于I期（图1G），提示其可作为独立预后指标。

NXF1抑制ECa恶性表型

过表达NXF1的KLE和ISH细胞增殖、迁移能力显著减弱（图2E-G），裸鼠模型中肿瘤体积和肺转移结节减少50%以上（图2H-J）。相反，NXF1敲除则促进肿瘤侵袭性，证实其抑癌功能。

NXF1-SRSF3互作调控SP4剪接

RNA-seq发现NXF1过表达导致5772个差异剪接事件，其中SP4外显子3跳跃最为显著（图3A-C）。共免疫沉淀(Co-IP)实验证实NXF1通过第221位天冬氨酸与SRSF3的86-90位精氨酸簇结合（图4D-H），这种相互作用不依赖RNA存在（图3E-F）。

分子机制解析

RNA亲和纯化显示SRSF3通过RRM结构域结合SP4外显子3的848-866位点（图6E），而NXF1以剂量依赖性方式阻断该结合（图6D）。突变实验证实，当SRSF3的RRR基序（R86A/R88A/R90A）或NXF1的D221A突变时，二者互作消失（图4E-H），且D221A突变体在体内抑癌效果减弱（图4I）。

SP4亚型的生物学差异

临床样本中，肿瘤组织的L-SP4（含外显子3）水平是正常组织的3倍，而S-SP4（不含外显子3）减少60%（图7C）。功能回复实验证明，仅L-SP4能逆转NXF1的抑癌效应（图8B-D），其过表达可上调CXCR4、PTGS2等促癌基因（图S4F）。

该研究不仅阐明NXF1-SRSF3-SP4轴在ECa中的核心调控作用，更揭示了RNA结合蛋白与剪接因子互作调控转录因子可变剪接的新范式。从转化医学角度看，NXF1表达水平可作为ECa分子分型的补充指标，而靶向SRSF3的RRM结构域或能开发新型剪接调控疗法。值得关注的是，SP4外显子3编码的转录激活域或是促癌关键元件，这为后续开发特异性阻断L-SP4的小分子药物提供了精确靶点。

研究也存在样本量限制，作者指出未来需扩大晚期ECa队列验证临床相关性，并通过外泌体递送等技术探索靶向干预策略。这些发现为理解RNA代谢与肿瘤表观遗传的交叉调控提供了新视角，也为ECa的精准诊疗开辟了道路。