LncRNA MIR31HG通过TTF-1介导的PI3K-AKT-mTOR通路激活促进甲状腺乳头状癌上皮-间质转化的机制研究

推荐：本研究针对甲状腺乳头状癌(PTC)侵袭转移机制不明的临床难题，通过RNA pull-down、CUT-Tag等高通量技术，首次揭示lncRNA MIR31HG作为分子支架促进TTF-1/ITGA3互作，激活PI3K-AKT-mTOR通路诱导EMT的分子机制，为PTC诊疗提供新靶点。

　　

甲状腺癌作为最常见的内分泌恶性肿瘤，其发病率正以每年稳定的速度增长，其中乳头状癌(PTC)占所有甲状腺癌的80%以上。尽管多数PTC患者预后良好，但约5-20%的病例会出现侵袭性生长和远处转移，成为导致患者死亡的主要原因。目前临床面临的核心困境在于：缺乏能准确预测PTC恶性进展的分子标志物，且对调控肿瘤转移的关键机制认识不足。尤其值得注意的是，即使广泛应用的BRAF V600E突变检测，其与患者预后的相关性仍存在争议。这种诊断手段的局限性凸显了探索新分子靶点的紧迫性。

针对这一重大临床需求，复旦大学附属肿瘤医院头颈外科的研究团队将目光投向长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）这一新兴调控分子。lncRNA作为长度超过200个核苷酸的非编码RNA，已被证实在肿瘤发生发展中扮演"分子海绵"、"蛋白支架"等多重角色。其中，MIR31HG作为miR-31的宿主基因，在肺癌、乳腺癌等恶性肿瘤中呈现异常高表达，但其在PTC中的具体功能机制仍是未解之谜。

研究人员通过整合GSE33630等四个GEO数据集，筛选出1135个差异表达基因，锁定MIR31HG作为关键候选分子。为系统解析其作用机制，团队运用RNA pull-down联合质谱分析、染色质靶向切割标记(CUT&Tag)、RNA免疫共沉淀(RIP)等前沿技术，并建立裸鼠移植瘤模型。临床样本分析涵盖复旦大学附属肿瘤中心的82例和TCGA数据库的314例PTC组织。

研究首先证实MIR31HG在PTC中显著高表达，且与淋巴结转移和BRAF突变正相关。体外实验显示，过表达MIR31HG可增强PTC细胞迁移侵袭能力。机制研究发现：

1. MIR31HG-TTF-1互作鉴定：RNA pull-down联合Western blot验证MIR31HG直接结合转录终止因子1(TTF-1)，RIP实验确定其结合区域位于TTF-1的T3截短体(498-886aa)，该区域通常与抑癌因子ARF相互作用。

2. 功能协同效应：Transwell实验证实TTF-1过表达同样促进PTC细胞侵袭，且shRNA敲低TTF-1可逆转MIR31HG的促转移效应。裸鼠实验显示两者过表达均显著加速肿瘤生长。

3. PI3K-AKT-mTOR通路激活：RNA-seq分析揭示TTF-1过表达显著富集PI3K-AKT通路相关基因，Western blot检测到p-AKT和p-mTOR水平升高。

4. EMT调控机制：CUT&Tag技术发现TTF-1直接结合ITGA3启动子，Co-IP证实MIR31HG作为支架增强TTF-1/ITGA3互作。临床样本显示高表达MIR31HG组EMT标志物N-cadherin、Vimentin上调，E-cadherin下调。

这项发表于《Journal of Psychosomatic Research》的研究首次阐明"lncRNA MIR31HG-TTF-1-ITGA3"轴通过PI3K-AKT-mTOR通路调控EMT的分子机制。其创新性体现在：①发现MIR31HG作为新型分子支架的生物学功能；②揭示TTF-1在PTC中的促癌作用；③阐明ITGA3通过非经典整合素途径激活PI3K信号。这些发现不仅填补了PTC转移机制的理论空白，更为临床提供了MIR31HG/TTF-1这一潜在的诊断标志物组合，尤其对BRAF阴性患者的风险分层具有重要价值。

研究也存在样本量有限、亚细胞共定位机制未明等局限。未来需扩大队列验证MIR31HG的预后预测价值，并探索靶向该通路的治疗策略。值得一提的是，MIR31HG在细胞衰老过程中的核质转运现象提示其可能具有更复杂的时空调控网络，这为后续研究指明了新方向。