大丽花块根多糖DLH-W通过VEGF/VEGFR-MAPK-PI3K/AKT通路促进血管新生的机制研究

本研究首次从大丽花(Dahlia variabilis)块根中分离纯化出均一分子量中性多糖DLH-W，其结构为β-(1→2)连接的果糖链末端带有α-(1→2)葡萄糖残基。体外实验表明DLH-W(200μg/mL)可显著提升HUVECs细胞活力(55%)、迁移率(66%)和管形成能力(96%)，斑马鱼模型证实其促血管生成作用(ISV总长度798μm)。分子对接和RT-qPCR揭示其通过VEGF/VEGFR、MAPK和PI3K/AKT通路发挥作用。

　　

Highlight
材料与化学试剂
大丽花块根购自国伟牡丹种植有限公司（中国菏泽）。源叶生物技术（上海）提供离子色谱用单糖标准品，包括果糖、岩藻糖、阿拉伯糖等15种单糖。美国联合碳化公司（康涅狄格州）供应其他实验试剂。

Purification and isolation
如图1A所示，大丽花块根经干燥粉碎后，依次用石油醚和无水乙醇脱脂，水提醇沉获得粗多糖。经脱蛋白处理后，通过DEAE-52玻璃柱和SUGAR BRT-101凝胶柱纯化获得DLH-W。结构分析显示其具有β-(1→2)连接的果糖主链和α-(1→2)连接的葡萄糖末端。

Conclusions
本研究首次报道了具有明确分子量分布的纯化大丽花多糖DLH-W。该β-(1→2)果聚糖能通过增强HUVECs活力（55% vs 损伤组）、迁移（66%迁移率）和管形成（96%管长），在斑马鱼模型中显著促进ISV血管网络形成（总长798μm）。机制研究表明其促血管生成作用与VEGF/VEGFR信号传导、MAPK和PI3K/AKT通路激活密切相关。