Caerin 1.1/1.9通过干扰KHDRBS1-DDX5调控轴诱导IL-18介导的HeLa细胞焦亡机制研究

本研究针对宫颈癌治疗中免疫原性细胞死亡诱导的难题，揭示了蛙源宿主防御肽Caerin 1.1/1.9(F1F3)通过靶向RNA结合蛋白KHDRBS1和DDX5调控轴，激活GSDME非依赖性焦亡通路的新机制。研究人员发现F1F3可特异性结合KHDRBS1( Lys155/185/200)和DDX5( Lys490)，敲除KHDRBS1显著增强IL-18分泌和肿瘤对治疗的敏感性，为开发基于焦亡诱导的宫颈癌免疫治疗提供了新靶点。

　　

宫颈癌作为全球女性健康重大威胁，尤其在HPV疫苗接种率低的发展中国家，晚期患者5年生存率不足20%。传统化疗面临耐药性和免疫抑制微环境等挑战，而程序性细胞死亡新形式——焦亡(pyroptosis)因其能释放促炎因子激活抗肿瘤免疫的特性备受关注。贵州大学医学院联合中山中奥生物科技的研究团队在《Scientific Reports》发表的研究，揭示了蛙源宿主防御肽Caerin 1.1/1.9(F1F3)通过靶向KHDRBS1-DDX5分子轴诱导非经典焦亡通路的新机制。

研究采用CRISPR-Cas9基因敲除、XL-MS(交联质谱)互作分析、流式细胞术等关键技术，在HeLa细胞模型和NSG小鼠移植瘤模型中系统评估了F1F3的生物学效应。通过构建GSDME、KHDRBS1和DDX5基因敲除细胞系，结合IL-18 ELISA检测和LDH释放实验，阐明了F1F3诱导焦亡的分子机制。

F1F3诱导的HeLa细胞焦亡不依赖GSDME
研究发现F1F3处理能引起典型焦亡形态学特征，包括细胞膜气泡形成和LDH释放。令人意外的是，GSDME敲除后IL-18分泌水平保持不变，且qPCR显示其他gasdermin家族成员无代偿性上调，提示存在非经典焦亡通路。

XL-MS揭示F1结合KHDRBS1而F3靶向DDX5
交联质谱鉴定出F1与KHDRBS1在Lys155/185/200位点结合，F3与DDX5在Lys490相互作用。对照肽P3未显示任何蛋白结合活性，证实了相互作用的特异性。

KHDRBS1/DX5敲除增强细胞对F1F3敏感性
MTT实验显示KHDRBS1或DDX5敲除使HeLa细胞IC₅₀值降低40-50%。实时成像观察到更显著的焦亡形态变化，伴随IL-18分泌增加2.5倍。过表达KHDRBS1则抑制IL-18释放，证实其负调控作用。

KHDRBS1缺失加速肿瘤生长但增强治疗响应
NSG小鼠模型显示KHDRBS1敲除肿瘤体积增大30%，但F1F3治疗后肿瘤抑制率达65%。组织学分析显示治疗组M1型巨噬细胞(iNOS⁺CD86⁺)浸润增加，CD206⁺CD163⁺ M2型减少，提示免疫微环境重编程。

这项研究首次阐明KHDRBS1-DDX5调控轴在焦亡中的关键作用，发现F1F3可通过干扰该轴激活GSDME非依赖性焦亡通路。特别值得注意的是，KHDRBS1表现出"双刃剑"特性——在免疫健全环境中可能促进肿瘤进展，而在免疫缺陷条件下反而抑制生长。这为开发基于RNA结合蛋白靶向的联合免疫疗法提供了新思路，也为克服宫颈癌治疗耐药性开辟了潜在途径。研究揭示的IL-18调控新机制，对理解细胞死亡与免疫激活的交叉对话具有重要理论价值。