基于FEN1辅助级联酶反应(FACER)的个人血糖仪一步免洗核酸检测新技术

【字体: 时间:2025年08月01日 来源:Talanta 6.1

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  本文推荐一种创新性核酸检测方法:通过瓣状核酸内切酶(FEN1)介导的级联酶反应(CER),将靶DNA识别信号转化为葡萄糖浓度变化,利用个人血糖仪(PGM)实现便携式检测。该方法突破传统核酸检测对专业设备的依赖,具有操作简便(one-step)、无需洗涤(washing-free)等优势,为现场诊断(point-of-care testing)提供新思路。

  

亮点
这项研究开发了一种革命性的检测策略——将核酸识别事件转化为人人都能读懂的血糖数值!

基本原理
FEN1辅助级联酶反应检测平台(FACER)的核心原理如图1所示。当特异性设计的上下游探针(UP/DP)与靶DNA结合时,上游探针(UP)会像"分子剪刀"一样在DNA双链上制造切口,形成独特的瓣状结构。下游探针(DP)5'端的腺苷核糖核苷酸(rA)就是这个信号放大器的启动开关——FEN1酶精准剪切rA位点释放出腺苷酸(AMP),进而触发由三种酶(肌激酶MK、丙酮酸激酶PK、己糖激酶HK)组成的"分子多米诺骨牌"反应,最终通过个人血糖仪检测葡萄糖消耗量。

结论
我们成功构建了将DNA识别信号转化为PGM可读信号的分子电路。这个智能系统不仅实现了0.1 nM的检测灵敏度,更能区分单碱基突变,就像给血糖仪装上了"DNA识别芯片"。该技术为居家自测、偏远地区医疗等场景提供了突破性的解决方案。

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