纳米脂质体靶向肿瘤引流淋巴结递送PD-1拮抗肽重塑CD8+T细胞抗肝癌免疫应答

本研究针对肝癌免疫治疗中PD-1/PD-L1阻断疗法响应率低的问题，开发了肽偶联纳米脂质体(LPs)靶向递送系统。浙江大学医学院团队通过优化脂质体理化性质实现肿瘤引流淋巴结(TdLNs)精准靶向，证实LPs可激活TCF7+组织驻留记忆样T细胞(Ttsm)和祖细胞耗竭T细胞(Tpex)，显著增强CD8+T细胞抗肿瘤活性，为克服肝癌免疫治疗耐药提供新策略。

　　

肝癌作为全球高发恶性肿瘤，免疫检查点阻断(ICB)疗法的临床响应率长期徘徊在20%左右。究其原因，肿瘤微环境(TME)中CD8⁺T细胞的功能耗竭是关键障碍，而作为免疫启动中枢的肿瘤引流淋巴结(TdLNs)却常被传统疗法忽视。更棘手的是，现有PD-1抑制剂存在系统毒性大、淋巴组织蓄积差等问题，难以有效激活TdLNs中具有再生潜力的祖细胞耗竭T细胞(T_pex)亚群。

针对这一系列挑战，浙江大学医学院附属第一医院肝胆胰外科团队在《Journal of Nanobiotechnology》发表创新研究。他们设计出多分支脂质修饰的PD-1拮抗肽纳米粒(LPs)，通过巧妙调控粒径(135.3±10.6 nm)和表面PEG密度，使其像"智能导弹"般精准富集于TdLNs。研究人员采用动态光散射和透射电镜验证纳米粒稳定性，通过近红外荧光成像实时追踪体内分布，并建立Hepa1-6和Hep53.4两种免疫活性小鼠模型评估疗效。

关键技术创新
研究团队通过CDI介导的偶联反应合成脂质-P-F4复合物，采用透析法制备载药脂质体。通过免疫缺陷鼠模型和淋巴结切除术验证机制依赖性，结合流式细胞术分析T细胞亚群，并运用RNA-seq解析TdLNs转录组特征。

重塑TdLNs免疫生态
在Hepa1-6模型中，LPs使TdLNs的CD3⁺T细胞扩增近2倍(Fig.3E)，同时下调PD-1和TIGIT表达(Fig.7D)。转录组分析揭示脂质代谢通路和白细胞活化信号显著富集(Fig.6D)，证实LPs通过代谢重编程激活淋巴结免疫应答。

双模型验证治疗效力
LPs在两种肝癌模型中均显示显著抑瘤效果：Hepa1-6模型肿瘤重量减少67%(Fig.3C)，Hep53.4模型Ki-67⁺增殖细胞下降54%(Fig.4E)。流式分析显示TME中CD8⁺T细胞浸润增加3倍，同时TCF7和IFN-γ表达上调(Fig.7A)。

机制解析
研究首次发现LPs可特异性扩增TCF7⁺T_tsm和T_pex两个关键亚群(Fig.7E-F)。在Hep53.4模型中，T_tsm比例从12%提升至28%(Fig.7J)，这些细胞具有持续抗肿瘤潜力。淋巴结切除实验证实疗效完全依赖功能性TdLNs(Fig.6B)。

这项研究开创了淋巴靶向递送新范式，其创新性体现在：① 首次证实PD-1拮抗肽的淋巴结靶向可打破肝癌免疫耐受；② 揭示TdLNs中T_tsm/T_pex动态平衡是疗效决定因素；③ 为联合疗法提供新靶点。临床转化方面，LPs的血清半衰期延长5倍且无肝肾毒性(Fig.S2C)，具有良好开发前景。未来需探索其与放疗、疫苗等协同效应，并开展患者分层生物标志物研究。