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盐地碱蓬m6A RNA甲基化调控蛋白的全基因组鉴定及非生物胁迫响应机制解析
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月31日 来源:BMC Plant Biology 4.8
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本研究针对盐生植物盐地碱蓬(Suaeda salsa)中m6A RNA甲基化调控系统未知的科学问题,系统鉴定了22个m6A相关基因(6个writers、7个readers、9个erasers),通过进化分析和表达谱解析,揭示SsYTHDF1/4的核心调控作用及低温/ABA/盐胁迫响应特性,为植物表观转录组调控网络研究提供新范式。
在植物应对环境胁迫的复杂调控网络中,RNA表观遗传修饰正成为新兴的研究热点。N6-甲基腺苷(m6A)作为真核生物mRNA最丰富的化学修饰,通过writers(写入酶)、readers(阅读蛋白)和erasers(擦除酶)的动态调控,影响RNA代谢的各个环节。然而,这种调控机制在极端环境适应植物中仍属空白。盐地碱蓬作为典型的盐碱地指示植物,其独特的抗逆性与m6A修饰的潜在关联亟待探索。
南京林业大学林木遗传与育种重点实验室的研究团队在《BMC Plant Biology》发表的研究,首次系统鉴定了盐地碱蓬中22个m6A调控基因,包括MT-A70家族甲基转移酶、YTH结构域阅读蛋白和ALKBH去甲基化酶。研究通过比较基因组学、蛋白质互作网络和胁迫响应实验,揭示m6A调控网络在盐地碱蓬抗逆性中的核心作用,为作物抗逆遗传改良提供了新靶点。
关键技术方法包括:1)基于HMMER和BLAST的基因组规模筛选;2)系统发育树构建与蛋白结构预测;3)STRING数据库的蛋白质互作网络分析;4)qRT-PCR时空表达谱分析;5)低温(4℃)、ABA(100 μM)和盐胁迫(300 mM NaCl)处理实验。
研究结果
基因组鉴定与进化分析
通过保守结构域验证发现22个候选基因,包括6个writers(SsMTA/B/C、SsFIP37、SsVIR、SsHAKAI)、7个readers(SsYTHDF1-4、SsYTHDC、SsCPSF30-1/2)和9个erasers(SsALKBH1A-9B)。系统发育分析显示ALKBH10亚家族在盐地碱蓬中缺失,暗示独特的去甲基化机制。
蛋白互作网络特征
SsCPSF30-1被鉴定为枢纽蛋白(连接度=19),与mRNA监视通路(map03015)显著相关。甲基转移酶复合体组分(SsMTA/B、SsFIP37)呈现高度互作,模拟拟南芥中保守的催化核心结构。
胁迫响应模式
启动子分析显示68.18%基因含有MeJA响应元件(CGTCA),59.09%含ABRE元件。qRT-PCR证实SsYTHDF1/4组成型高表达,而SsALKBH1C在ABA处理6小时表达量激增3.96倍,盐胁迫下呈现12小时/24小时双峰响应。
讨论与意义
该研究首次绘制盐地碱蓬m6A调控图谱,揭示三个关键创新点:1)发现SsYTHDF1/4的泛组织高表达特征,突破传统YTH基因低拷贝认知;2)鉴定ALKBH10亚家族缺失现象,提示盐生植物可能演化出替代性去甲基化途径;3)揭示m6A调控与谷胱甘肽代谢(map00480)的关联,为氧化应激响应提供新机制解释。
研究建立的盐地碱蓬m6A数据库为后续功能研究奠定基础,其发现的胁迫响应元件和相位分离倾向性(如SsYTHDF3含PrLD结构域)为作物抗逆分子设计提供新思路。特别是SsALKBH1C的ABA敏感性,可能成为调控植物激素信号转导的关键开关,这为理解表观转录组与植物环境适应性的耦合机制开辟了新视角。
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