癌症相关成纤维细胞分泌乳酸通过增加锌指蛋白384的m6A修饰促进RNA聚合酶III亚基G介导的非小细胞肺癌上皮-间质转化

本研究揭示了癌症相关成纤维细胞（CAFs）通过分泌乳酸促进METTL3介导的ZNF384 m6A修饰，进而激活POLR3G转录并驱动非小细胞肺癌（NSCLC）上皮-间质转化（EMT）的新机制，为靶向肿瘤微环境（TME）治疗NSCLC转移提供了理论依据。

　　

3.1 ZNF384促进NSCLC细胞EMT

研究发现锌指蛋白384（ZNF384）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中显著高表达。通过敲低实验证实，ZNF384沉默可抑制A549和H1299细胞增殖，降低间质标志蛋白波形蛋白（vimentin）和Snail表达，同时上调上皮标志蛋白E-钙黏蛋白（E-Cadherin），表明其通过调控EMT关键分子驱动肿瘤转移。

3.2 CAFs通过METTL3 H3K18乳酰化增强ZNF384 m6A修饰

从NSCLC组织分离的癌症相关成纤维细胞（CAFs）显示α-SMA和FSP1阳性特征，且乳酸分泌量显著高于癌旁正常成纤维细胞（NFs）。机制上，CAFs分泌的乳酸通过组蛋白H3K18位点乳酰化（H3K18la）激活甲基转移酶METTL3启动子，进而增加ZNF384 mRNA的m6A修饰水平。使用乳酸生成抑制剂oxamate可逆转该效应。

3.3 CAFs-ZNF384轴驱动EMT进程

共培养实验表明，CAFs条件培养基显著提升NSCLC细胞迁移侵袭能力，而ZNF384敲除可阻断此促转移作用。Western blot显示CAFs通过上调ZNF384表达诱导EMT表型转换，该过程依赖METTL3介导的转录后调控。

3.4 ZNF384转录激活POLR3G

生物信息学预测和染色质免疫共沉淀（ChIP）证实ZNF384直接结合RNA聚合酶III亚基G（POLR3G）启动子区特定位点。双荧光素酶报告实验显示，ZNF384过表达使POLR3G启动子活性提升2.3倍，证实其转录调控作用。

3.5 POLR3G介导ZNF384促EMT功能

功能回复实验发现，POLR3G沉默可抵消ZNF384过表达引起的EMT标志物变化。在A549细胞中，POLR3G敲低使ZNF384诱导的侵袭能力下降62%，证实POLR3G是ZNF384下游效应分子。

讨论与展望

该研究首次阐明CAFs-乳酸-METTL3/ZNF384/POLR3G信号轴在NSCLC转移中的级联调控机制：

1. 代谢重编程：CAFs通过糖酵解分泌乳酸，诱导METTL3表观遗传激活
2. RNA修饰：METTL3催化ZNF384 m6A修饰增强其mRNA稳定性
3. 转录调控：ZNF384结合POLR3G启动子促进其表达
4. 表型转换：POLR3G最终驱动EMT进程

该发现为开发靶向TME的联合治疗策略（如乳酸代谢抑制剂联合m6A调节剂）提供新思路。未来需在动物模型中验证该通路，并探索ZNF384突变对NSCLC的影响。