猫源吞噬细胞与孢子丝菌属人兽共患病病原体互作机制的体外模型研究

这篇研究首次建立了猫源单核细胞衍生吞噬细胞(FMdP)与孢子丝菌属(Sporothrix brasiliensis/S. schenckii)的体外互作模型，揭示S. brasiliensis具有更高吞噬指数(PI)和延迟丝化特征，而S. schenckii需更高感染复数(MOI)才能产生更强细胞毒性。研究为理解猫对孢子丝菌病异常易感性提供了免疫学基础，符合动物实验3R原则（替代、减少、优化）。

　　

猫源吞噬细胞与孢子丝菌属互作机制的突破性发现

2.1 研究背景与意义

孢子丝菌病在巴西已从零星暴发发展为超地方性流行，其中巴西孢子丝菌(S. brasiliensis)引发的猫传人病例尤为严重。与亚洲地区流行的申克孢子丝菌(S. schenckii)不同，S. brasiliensis感染常导致猫出现严重症状和高真菌负荷。本研究首次建立体外模型，揭示猫免疫细胞应对这两种病原体的早期事件。

2.2 创新性实验设计

采用健康家猫外周血单核细胞(PBMC)衍生的吞噬细胞(FMdP)，通过不同感染复数(MOI 1:1和3:1)与两种孢子丝菌酵母相相互作用。独创性使用通用猫血清(UFS)和热灭活血清(UFSin)培养体系，结合罗马诺夫斯基染色和乳酸脱氢酶(LDH)检测，系统评估了吞噬指数(PI)和细胞毒性。

3.1 形态转化与吞噬效率的物种差异

S. schenckii在互作1小时内即出现丝化并持续增强，而S. brasiliensis可维持酵母形态长达18小时。在MOI 1:1条件下，S. brasiliensis的PI显著高于S. schenckii(p<0.0001)。血清热灭活使两种菌的吞噬率降低，但对S. brasiliensis影响更显著。

3.2 细胞毒性特征解析

S. brasiliensis在各类条件下均保持15%-70%的细胞毒性，而S. schenckii需更高MOI才能达到60%毒性(p≤0.01)。值得注意的是，在UFSin培养基中，S. schenckii需要3倍MOI才能产生超越S. brasiliensis的细胞毒性。

4.1 病原体适应机制

延迟丝化可能是S. brasiliensis适应猫科动物较高体温(38-39°C)的关键策略。该特性有利于其以酵母形态通过血流扩散，与临床观察到的全身性感染特征相符。

4.2 免疫识别缺陷假说

与人类不同，猫感染部位常缺乏化脓性肉芽肿，巨噬细胞内可见大量酵母增殖。本研究发现FMdP对S. brasiliensis的高效吞噬但低杀伤特性，可能解释了临床常见的治疗失败和复发案例。

4.3 转化医学价值

该模型成功模拟了孢子丝菌在猫体内的寄生特征，为后续研究真菌配体-猫细胞受体识别机制奠定基础。采用血库猫血样建立的标准化流程，符合动物实验3R原则(替代、减少、优化)，为抗真菌药物筛选提供了符合伦理的研究平台。

研究发现S. brasiliensis的高PI特性与其临床高致病性相关，而两种菌株差异性的细胞毒性模式提示其可能采用不同免疫逃逸策略。这些发现为开发针对性防控措施提供了关键靶点，对遏制这种人兽共患病跨境传播具有重要意义。