ADAR1 mRNA定量检测：提升HIV感染者肛门细胞学异常患者高级别鳞状上皮内病变（HSIL）预测的新策略

本研究前瞻性评估了ADAR1 mRNA定量在HIV感染者（PWH）肛门癌筛查中的应用价值。通过171例肛门细胞学异常患者的队列分析，发现HSIL患者ADAR1 mRNA水平显著升高（中位数49.4 vs. 4.1 RU，p<0.001），ROC曲线下面积（AUC）达0.83。当阈值设为≥24.8 RU时，特异性达92%，较传统HR-HPV E6/E7 mRNA检测减少77%不必要的高分辨率肛门镜检查（HRA）。该研究为优化肛门癌筛查路径提供了新型分子标志物。

　　

Abstract

肛门鳞状细胞癌（ASCC）在HIV感染者（PWH）中的发病率较普通人群高37倍，其中高级别鳞状上皮内病变（HSIL）是明确癌前病变。当前依赖肛门细胞学的筛查方法因特异性不足（约50%假阳性）导致大量不必要的高分辨率肛门镜（HRA）检查。本研究首次证实，通过肛门拭子定量检测RNA编辑酶ADAR1的mRNA水平可显著提升HSIL预测效能。在171例接受HRA的PWH中，HSIL组ADAR1 mRNA中位数达49.4 RU，显著高于非HSIL组的4.1 RU（p<0.001）。ROC分析显示AUC为0.83，最佳截断值24.8 RU时特异性达92%，阳性预测值（PPV）74%，较传统HR-HPV E6/E7 mRNA检测减少28.4%的HRA转诊。

What's New?

该研究突破性地揭示ADAR1 p150亚型（干扰素诱导基因）在HPV相关病变中的双重作用：既参与免疫逃逸，又可作为分子标签。技术层面，采用多中心标准化采样流程（ThinPrep保存液与eNAT管双重保障RNA稳定性），并通过HMBS内参基因实现RT-qPCR数据归一化。与现有E6/E7 mRNA检测相比，ADAR1 mRNA将筛查准确率从64%提升至88%，尤其对多HPV基因型感染（HSIL组中位数5型 vs. 非HSIL组3型）的鉴别优势显著。

2 METHODS

2.1 Study design and participants

西班牙埃尔切大学医院性健康中心的前瞻性队列，纳入标准为6个月内肛门细胞学异常（ASC-US至HSIL）的PWH，排除近期肛肠手术或活动性直肠炎患者。值得注意的是，76.3%入组者为男男性行为者（MSM），反映该人群的高风险特征。

2.2 Study procedures

创新性采用三轨采样方案：

1. 常规细胞学刷（ThinPrep液基）用于病理诊断
2. 尼龙植绒拭子（Copan FLOQSwab）用于HPV DNA分型（Allplex HPV28检测28种亚型）
3. 专用细胞刷（CMC A-01）用于ADAR1 mRNA提取（RNeasy Mini Kit）
   HRA活检严格遵循LAST术语标准，由两位传染病专家盲法评估。

2.3 ADAR1 mRNA分析关键技术

采用TaqMan探针法（Hs00241666_m1），以2^?ΔΔCT算法计算相对表达量（RU）。质控要点包括：

• cDNA合成统一使用100 ng RNA输入量
• QuantStudio 5系统双复孔检测
• 阈值循环数（CT）差异>1时触发重复实验

2.5 E6/E7 mRNA对比试验

通过Panther全自动系统运行Aptima HPV assay，检测14种HR-HPV的致癌基因转录本，为ADAR1提供直接比较基准。

核心发现

1. 分子阈值：ADAR1 mRNA在24.8 RU时达到73%灵敏度/92%特异性的最佳平衡，其阴性预测值（NPV）92%提示对排除HSIL极具价值。
2. 临床转化：若替代现有细胞学筛查，可使HRA需求量从77.2%降至48.8%，节省38.4%的医疗资源。
3. 机制线索：ADAR1过表达与HPV基因型负荷正相关（r=0.61，p<0.01），暗示其可能通过干扰素通路（PKR/Th1轴）促进病毒持续感染。

这项研究为肛门癌精准筛查提供了新范式，未来可探索ADAR1抑制剂（如8-氮杂腺苷）的化学预防潜力。