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重组酶聚合酶扩增驱动的双联侧流层析诊断试剂盒在传染性胰腺坏死病毒与病毒性出血性败血症病毒同步检测中的应用:RPA与PCR方法的比较分析
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月31日 来源:Journal of Fish Diseases 2.2
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为解决水产养殖中传染病诊断时效性差、成本高的问题,来自土耳其的研究团队开发了基于重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的双联侧流层析试纸条,可同步检测鳟鱼养殖中两种重要病原体——传染性胰腺坏死病毒(IPNV)和病毒性出血性败血症病毒(VHSV Ie)。研究表明,该lfRT-RPA检测对VHSV Ie的灵敏度与rtRT-PCR相当,对IPNV的灵敏度低10倍,为水产养殖场提供了便捷的现场诊断方案。
水产养殖业传染病的快速诊断一直是行业痛点,传统实验室检测因耗时长、成本高而难以普及,导致疫情报告滞后、经济损失加剧。针对土耳其鳟鱼养殖业面临的重大威胁——传染性胰腺坏死病毒(IPNV)和病毒性出血性败血症病毒(VHSV Ie),研究者创新性地将重组酶聚合酶扩增技术(RPA)与侧流层析试纸条(lateral flow)相结合,开发出可现场实施的双联检测系统。
通过对比定量RT-PCR(qRT-PCR)、实时RT-RPA(rtRT-RPA)和侧流RT-RPA(lfRT-RPA)三种方法的单重与双重检测性能,发现lfRT-RPA对VHSV Ie的检测灵敏度与分子金标准rtRT-PCR不相上下,但对IPNV的检测限约高出10倍。这种便携式诊断工具的成功研发,为水产养殖场提供了堪比实验室的即时检测能力,将有效提升疫情响应速度,阻断病原体在养殖系统间的传播链。该技术路线还可拓展应用于其他水产病原体的现场监测,具有重要的产业推广价值。
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