揭示B7/CD28家族蛋白在肝细胞癌中的细胞通讯机制及预后价值

这篇研究通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）和生物信息学分析，系统解析了B7/CD28家族（含PD-L1、B7H3/CD276等）在肝细胞癌（HCC）肿瘤微环境（TME）中的分布特征及细胞间通讯网络。研究发现B7H3在基质细胞中的表达与患者不良预后显著相关，为HCC免疫治疗提供了新靶点。

　　

引言

肝细胞癌（HCC）是全球癌症相关死亡的主要原因之一，免疫检查点抑制剂（如PD-1/PD-L1阻断剂）的临床响应率仅为15-25%。B7/CD28家族作为免疫调节关键分子群，其成员（如CTLA4、ICOSLG、HHLA2等）在HCC中的作用尚未系统阐明。单细胞测序技术的突破为揭示该家族在TME中的空间分布和功能提供了新视角。

材料与方法

研究整合了4个公共数据库（GSE136103等）的42例肝组织单细胞数据（89,246个细胞），通过Seurat软件进行聚类分析，标记8种细胞类型：肝细胞（ALB⁺）、恶性细胞（AFP⁺）、巨噬细胞（CD163⁺）等。利用CellPhoneDB分析B7/CD28介导的细胞互作，并通过TCGA数据库建立LASSO-Cox预后模型。临床验证阶段纳入94例HCC手术患者，采用多重免疫荧光（IF）量化B7H3的三种表达模式：肿瘤细胞（Tc）、基质（Strm）及混合型。

结果

单细胞图谱解析
B7/CD28家族成员在巨噬细胞、内皮细胞和恶性细胞中高表达。与正常肝组织相比，HCC中CD80、B7H3表达上调而VSIR下调。细胞通讯分析显示，CD276-TREML2、PDCD1LG2-PDCD1等配体-受体对在肿瘤-基质互作中活跃。

预后模型构建
TCGA队列中，B7H3是唯一通过LASSO筛选的独立预后因子（风险比HR=1.82）。高风险组患者总生存期（OS）显著缩短（p=0.0222），ROC曲线下面积（AUC）1年达0.631。

临床样本验证
90%的HCC组织表达B7H3，其中基质表达型（占68%）与更差的OS显著相关（p=0.0324），而肿瘤细胞表达型无统计学意义。多重IF显示B7H3⁺基质细胞通过重塑TME促进免疫逃逸。

讨论

B7H3在HCC基质中的特异性定位提示其可能通过调控成纤维细胞（CAFs）和血管内皮功能驱动肿瘤进展。既往研究多关注肿瘤细胞表达，本研究发现基质B7H3的预后价值更高，与卵巢癌中B7H3⁺内皮细胞的报道一致。局限性在于回顾性设计和小样本量，未来需探索B7H3抗体联合抗血管治疗的潜力。

结论

该研究首次绘制了B7/CD28家族在HCC单细胞水平的动态互作图谱，确立基质B7H3为新型预后标志物，为开发靶向肿瘤微环境的联合疗法提供了理论依据。