基于TEMPOL自由基衰减的脂溶性抗氧化剂清除乙醇体系过氧自由基活性高效评估新方法

为解决脂溶性抗氧化剂活性评估难题，研究人员开发了一种基于4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶-N-氧自由基（TEMPOL）电子自旋共振（ESR）信号衰减的新型检测技术。通过2,2'-偶氮二(2,4-二甲基戊腈)（AMVN）热解诱导自由基反应，证实TEMPOL信号衰减与乙醇衍生过氧自由基相关。该方法在0.01 mmol/L 6-羟基-2,5,7,8-四甲基色满-2-羧酸（Trolox）浓度下即显示显著抑制效果，灵敏度优于传统ESR自旋捕获法，5分钟内即可完成检测，为脂溶性抗氧化剂评价提供了高效新工具。

　　

这项研究巧妙利用4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶-N-氧自由基（TEMPOL）作为分子探针，在乙醇体系中建立了一种检测脂溶性抗氧化剂活性的创新方法。当2,2'-偶氮二(2,4-二甲基戊腈)（AMVN）热分解产生自由基时，TEMPOL的电子自旋共振（ESR）信号呈现特异性衰减现象。通过脱气实验和5-(二乙氧基磷酰基)-5-甲基-1-吡咯啉-N-氧化物（DEPMPO）自旋捕获技术，证实信号衰减源于TEMPOL与乙醇衍生过氧自由基的链式反应。

令人振奋的是，仅需0.01 mmol/L浓度的水溶性维生素E类似物Trolox就能显著抑制信号衰减，检测灵敏度远超传统ESR自旋捕获法。在抗氧化剂筛选中，没食子酸甲酯展现出比Trolox更强的抑制能力，而2,6-二叔丁基对甲酚和白藜芦醇作用较弱。这些发现与DEPMPO捕获的过氧自由基加合物变化趋势高度吻合，证实该方法能精准反映抗氧化剂清除过氧自由基的活性。

这项技术突破性地实现了五分钟内完成检测，为快速评估脂溶性抗氧化剂提供了"分子尺"，在功能性食品开发和抗氧化药物筛选中具有重要应用价值。通过TEMPOL这个"自由基哨兵"的信号变化，研究人员成功建立了一个简单、灵敏且高效的抗氧化活性评价新体系。