独花兰离体再生体系的建立

　　摘要： 独花兰(Changnienia amoena)被列为国家二级珍稀濒危植物, 作为兰科单种属植物, 既是珍贵的药用植物和潜在可开发优良野生花卉资源, 也是研究兰科植物系统发育的优良材料。但由于野生资源匮乏, 目前缺少对其再生体系的研究。该研究以独花兰假鳞茎为外植体, 探索消毒条件、外植体切块方式、不同采集时间及植物生长调节剂浓度对外植体灭菌效果、不定芽诱导和组培苗生根的影响, 初步建立了独花兰再生体系。结果表明, 用75%乙醇处理30秒再经过0.1%升汞溶液消毒12分钟为独花兰假鳞茎的最佳消毒方法; 用不同切块方式处理假鳞茎皆能诱导不定芽, 但完整假鳞茎的诱芽率远高于切块处理后的假鳞茎; 每年5月采集假鳞茎进行不定芽诱导效果最好。独花兰假鳞茎不定芽诱导最适培养基为1/2 MS+1.0 mg?L–1 6-BA+0.5 mg?L–1 NAA, 诱导率为75.56%; 最适生根培养基为1/2 MS+0.4 mg?L–1 6-BA+1.0 mg?L–1 NAA, 生根率可达93.33%; 经50 mg?L–1 6-BA溶液处理后将组培苗移栽在腐殖土中覆膜炼苗, 可显著提高成活率, 成活率达94.44%。