维生素C浓度对RT-PCR检测结果的影响：COVID-19诊断准确性的新挑战

本研究针对COVID-19诊断中RT-PCR（逆转录聚合酶链反应）可能存在的干扰因素，探讨了维生素C对检测结果的影响。研究人员通过分析98例患者鼻咽样本，发现高浓度维生素C（50-100 mg/ml）会显著改变RT-PCR的Ct值（循环阈值）和反应曲线，导致低病毒载量样本（Ct≥30）出现假阴性结果。这一发现揭示了维生素C摄入可能影响COVID-19诊断准确性，为临床检测规范提供了重要参考。

　　

在COVID-19大流行期间，RT-PCR作为诊断金标准却面临假阴性率高达58%的挑战。有趣的是，临床观察发现部分服用维生素C的患者检测结果异常，这引发了研究人员的思考：作为常见抗氧化剂的维生素C，是否会干扰病毒核酸检测？

TOBB经济与技术大学医学院的研究团队对此展开了系统研究。他们发现维生素C的化学特性——既能作为电子供体中和氧化分子，又能通过还原金属离子产生活性氧——可能通过多种机制影响核酸稳定性。更关键的是，疫情期间普遍采用的高剂量维生素C疗法（尤其静脉注射）可能直接改变上呼吸道样本的生化环境。

研究采用多浓度梯度（0-100 mg/ml）和时间序列（1-48小时）设计，通过Bio-Rad CFX96实时荧光定量系统分析样本。主要技术包括：1）病毒核酸提取免提技术（vNAT缓冲液直接裂解）；2）双盲分组策略（按Ct值分为强阳性<30、弱阳性≥30和阴性组）；3）图形分类系统（将异常曲线编码为锯齿状、正弦波等4类）；4）非参数重复测量方差分析（弗里德曼检验）。

样本特征与分组
98例鼻咽拭子样本中，30例为强阳性（Ct<30），37例弱阳性（Ct≥30），31例阴性。所有阳性病例均经临床症状验证，排除疫苗接种者及慢性病患者干扰。

维生素C对Ct值的影响

• 高病毒载量组（Ct<30）：50 mg/ml维生素C使1小时Ct值显著升高（p<0.001），但100 mg/ml因图形畸变导致数据波动
• 低病毒载量组（Ct≥30）：50 mg/ml使24小时Ct值异常降低（p<0.05），可能引发假阴性
• 阴性组：维生素C未显著改变Ct值，但导致反应曲线畸变

相对荧光单位(RFU)变化
所有浓度维生素C均降低RFU信号强度（p<0.05），其中100 mg/ml使强阳性样本RFU降低65.6%，弱阳性样本降低62.4%。值得注意的是，这种抑制效应在10 mg/ml时已显现，提示即使常规剂量也可能干扰检测。

反应曲线畸变特征

50 mg/ml以上浓度使78.4%弱阳性样本出现正弦波（类型3）或不可评估图形（类型4），而强阳性样本主要表现为S型曲线振幅降低。阴性样本在100 mg/ml处理下，64.5%转为不可评估状态。

这项研究首次证实维生素C可通过化学干扰和物理效应双重机制影响RT-PCR检测：一方面通过氧化还原反应降解病毒RNA，另一方面改变荧光探针工作环境。其临床意义在于提示需建立"维生素C洗脱期"制度——对于接受高剂量维生素C治疗的患者，建议间隔24小时再采样。同时，实验室应建立异常曲线复核机制，避免因图形畸变导致的自动分析误差。

论文发表于《Scientific Reports》的发现为完善传染病诊断标准提供了新视角，尤其对依赖核酸检测的SARS-CoV-2、流感等呼吸道病毒监测具有普适性参考价值。未来研究可进一步探索维生素C与不同病毒RNA结构的特异性相互作用，以及缓冲液配方优化等解决方案。