m6A甲基化修饰的lncRNA RNF144A-AS1通过miR-1301-3p/RNF38通路促进肝细胞癌进展的机制研究

本研究针对肝细胞癌(HCC)缺乏有效治疗靶点的临床难题，揭示了lncRNA RNF144A-AS1在METTL3介导的m6A甲基化修饰下，通过ceRNA机制调控miR-1301-3p/RNF38轴促进HCC进展的分子机制。研究人员通过多组学分析结合体内外实验证实，RNF144A-AS1可作为HCC预后标志物和潜在治疗靶点，为肝癌精准诊疗提供了新思路。

　　

肝细胞癌(HCC)是全球第六大常见恶性肿瘤，其高死亡率主要归因于晚期诊断和治疗手段有限。尽管表观遗传调控在HCC中的作用日益受到关注，但m6A修饰与长链非编码RNA(lncRNA)的协同机制仍待深入探索。郑州大学第一附属医院肝胆胰外科的研究团队在《Biology Direct》发表的重要研究，首次揭示了lncRNA RNF144A-AS1通过m6A甲基化依赖的调控网络促进HCC进展的分子机制。

研究人员采用TCGA数据库分析结合136对临床样本验证，发现RNF144A-AS1在HCC中显著高表达且与不良预后相关。通过CCK-8、EdU、Transwell等实验证实其促进肿瘤增殖转移的功能。关键技术包括：m6A甲基化RNA免疫共沉淀(MeRIP-qPCR)验证修饰位点、双荧光素酶报告基因检测ceRNA机制、裸鼠皮下移植瘤和肺转移模型等体内实验。

RNF144A-AS1表达特征与临床意义
分析TCGA和30对HCC样本显示RNF144A-AS1在癌组织中显著上调（87%病例），FISH检测136对组织证实其表达与患者生存期负相关（p<0.0001）。

功能机制解析
METTL3通过识别RNF144A-AS1的5个m6A位点（SRAMP预测）增强其稳定性，IGF2BP1作为"reader"蛋白进一步维持RNA稳定（ActD半衰期实验验证）。RNF144A-AS1作为miR-1301-3p分子海绵，解除其对RNF38的抑制作用（双荧光素酶验证结合位点），最终激活促癌通路。

体内外实验验证
敲低RNF144A-AS1使HCC细胞增殖率下降40%（EdU实验），迁移抑制率达60%（Transwell）。裸鼠模型中，干预组肿瘤体积减少50%，肺转移结节数显著降低（p<0.001）。

该研究创新性阐明了METTL3/IGF2BP1-m6A-RNF144A-AS1-miR-1301-3p-RNF38调控轴（如图8F所示），不仅为HCC提供了新的预后标志物组合（RNF144A-AS1高表达与5年生存率降低相关），更揭示了表观转录组与ceRNA网络的交叉调控机制。值得注意的是，RNF38作为E3泛素连接酶，其稳定表达可能通过TGF-β等通路促进HCC进展，这为开发靶向m6A-lncRNA的联合治疗策略提供了理论依据。研究存在的临床样本量局限和RNF38下游机制未充分解析等问题，也为后续转化研究指明了方向。