靶向CSPG4的CAR-NK细胞增强抗胶质母细胞瘤活性的机制与临床转化研究

针对胶质母细胞瘤(GBM)治疗困境，四川大学团队开发了靶向CSPG4的二代CAR-NK细胞疗法。研究证实该疗法通过特异性识别CSPG4抗原，显著抑制肿瘤生长并延长生存期，为GBM免疫治疗提供新策略。

　　

胶质母细胞瘤(GBM)作为最具侵袭性的中枢神经系统恶性肿瘤，五年生存率不足10%，标准治疗后复发率超90%，亟需突破性治疗手段。虽然PD-1抗体和CAR-T细胞等免疫疗法为肿瘤治疗带来曙光，但GBM独特的免疫抑制微环境仍构成重大挑战。在此背景下，四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室的研究团队将目光投向天然杀伤(NK)细胞——这类无需抗原预敏且不受MHC限制的免疫细胞，通过基因工程改造使其携带靶向CSPG4(硫酸软骨素蛋白聚糖4)的嵌合抗原受体(CAR)，为GBM治疗开辟新途径。相关成果发表于《Cellular Oncology》。

研究团队采用二代CAR结构设计，整合CSPG4特异性单链抗体(scFv 763.74)、CD8跨膜域及CD28/CD3ζ共刺激域。通过中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)分析180例组织微阵列样本，证实CSPG4在60%以上中国GBM患者中高表达且与不良预后相关。关键实验包括：构建U87-luc原位脑瘤模型、流式细胞术检测细胞毒性、ELISA分析IFN-γ分泌、活体成像监测肿瘤负荷等。

CSPG4在GBM患者中的表达特征
分析CGGA数据库发现，CSPG4高表达患者生存期显著缩短(p<0.05)，且在IDH野生型GBM中表达更高。免疫组化显示WHO IV级GBM标本中CSPG4阳性率达62%，验证其作为治疗靶点的普适性。

CAR-NK细胞的构建与功能验证
成功构建的NK92-NG2-28z细胞显示膜定位特征，增殖能力提升30%(p<0.01)。体外实验证实其对CSPG4阳性细胞系(U87/A172/LN229)的杀伤效率达75-82%，较对照组提高2.3倍，IFN-γ分泌量增加4.5倍(p<0.001)。

体内抗肿瘤效应
皮下移植模型显示治疗组肿瘤体积减少58%(p<0.01)，原位模型延长中位生存期10天。病理检查证实治疗安全性，主要器官未见损伤。

该研究首次系统评估CSPG4靶向CAR-NK细胞在中国人群GBM中的治疗潜力，突破传统疗法局限。值得注意的是，虽然CAR-NK细胞展现显著抑瘤效果，但受限于体内持久性（约14天），未来需结合细胞因子辅助策略优化疗效。从转化医学角度看，该成果为开发通用型细胞疗法奠定基础，尤其对占GBM 50%以上的CSPG4阳性患者群体具有重要临床价值。