溶瘤病毒OH2通过抑制β-catenin/MMPs通路阻断非小细胞肺癌转移的机制研究

本研究针对非小细胞肺癌(NSCLC)高转移特性导致的临床治疗困境，通过体内外实验首次揭示溶瘤疱疹病毒OH2通过其皮层蛋白UL41降解β-catenin mRNA，进而抑制基质金属蛋白酶(MMPs)表达，显著降低肿瘤侵袭转移能力。该发现为开发靶向Wnt/β-catenin通路的新型抗转移疗法提供了理论依据，发表于《Communications Biology》的研究为临床转化奠定基础。

　　

在肺癌治疗领域，非小细胞肺癌(NSCLC)占所有病例的80-85%，其五年生存率长期低于5%，主要归因于肿瘤的高转移特性。尽管靶向治疗和免疫治疗取得进展，但转移仍是临床最大挑战。溶瘤病毒(OVs)作为新兴疗法，通过选择性裂解肿瘤细胞和激活免疫应答展现潜力，但其抗转移机制尚未明确。

湖北大学的研究团队在《Communications Biology》发表重要成果，发现重组溶瘤疱疹病毒2型(OH2)能显著抑制NSCLC转移。研究人员通过蛋白质组学、双荧光素酶报告系统等技术，证实OH2通过病毒皮层蛋白UL41靶向降解β-catenin mRNA，阻断Wnt/β-catenin信号通路，进而下调MMP2/7/9表达，最终抑制肿瘤细胞侵袭转移。该研究不仅揭示了OVs抗转移的新机制，更为临床开发靶向β-catenin的精准疗法提供了新策略。

关键技术方法包括：1) 采用伤口愈合和Transwell实验评估细胞迁移侵袭能力；2) 利用TMT标记的LC-MS/MS进行分泌蛋白组分析；3) 通过TOP/FOP闪光报告系统检测β-catenin转录活性；4) 构建UL41突变体验证其核酸酶功能；5) 建立裸鼠肺转移模型进行体内验证。

OH2抑制NSCLC迁移侵袭
通过伤口愈合和Transwell实验发现，OH2处理显著降低A549和H1299细胞的迁移和侵袭能力，且呈剂量依赖性。Western blot显示MMP2/7/9表达下降，而MMPs抑制剂GM6001可产生类似效果，证实OH2通过调控MMPs抑制转移。

蛋白质组学揭示ECM重塑
分泌蛋白组分析显示OH2处理后，A549细胞外基质分解相关蛋白(包括MMP1/2/10和TIMP1/2)显著下调。STRING分析表明这些蛋白在ECM降解网络中高度互作。

β-catenin通路调控机制
OH2降低β-catenin mRNA和蛋白水平，且蛋白酶体抑制剂MG132不能逆转该效应，提示调控发生在转录层面。免疫荧光和核质分离实验证实β-catenin核转位减少，TOP-Flash报告系统显示其转录活性下降50%。

UL41的关键作用
筛选发现OH2编码的UL41蛋白能特异性抑制β-catenin信号。突变实验证实其核酸酶活性位点(D34/D82/D217)对降解β-catenin mRNA至关重要。RIP-qPCR证明UL41直接结合β-catenin mRNA的3'UTR区ARE元件。

体内抗转移效果
在A549肺转移模型中，OH2预处理使裸鼠肺和肝脏转移结节数减少80%。免疫组化显示肿瘤组织β-catenin表达显著降低，Western blot证实MMPs同步下调。

该研究首次阐明溶瘤病毒通过UL41介导的β-catenin mRNA降解抑制肿瘤转移的分子机制，突破了传统OVs仅依赖细胞裂解和免疫激活的认识局限。临床意义在于：1) 为OH2的临床试验(NCT03866525)提供了抗转移理论依据；2) 揭示β-catenin/MMPs轴可作为NSCLC治疗新靶点；3) UL41的mRNA靶向降解策略为RNA干预技术提供新思路。与已获批的T-VEC(HSV1型)相比，基于HSV2型的OH2展现更强抗肿瘤活性，且在胃肠道癌和肉瘤中已显示临床前景。未来研究可探索OH2与免疫检查点抑制剂的联合方案，或用于术前新辅助治疗以减少微转移。