蝙蝠TBK1在抗RNA病毒先天免疫中的保守功能解析：揭示蝙蝠独特免疫耐受机制

这篇研究揭示了蝙蝠TANK结合激酶1（TBK1）在抗病毒先天免疫中的保守功能。通过生物信息学分析和多物种细胞实验，证实蝙蝠TBK1能通过IRF1/3/7信号轴显著上调IFNβ表达（抑制VSV/NDV病毒复制），其激酶结构域（PKD）、泛素样结构域（ULD）和卷曲螺旋域（CCD1）是功能关键。该研究为解析蝙蝠病毒耐受的免疫机制提供了新视角。

　　

1 引言
蝙蝠作为唯一能飞行的哺乳动物，其免疫系统展现出与病毒长期共存的独特能力。研究表明，超过4100种病毒可感染蝙蝠，包括SARS-CoV-2、MERS-CoV等高致死率病原体，但蝙蝠却能无症状携带。先天免疫系统中的关键节点蛋白TANK结合激酶1（TBK1）通过模式识别受体（PRRs）识别病原体后，激活干扰素调节因子（IRFs）和NF-κB，诱导I型干扰素（IFN I）产生。然而，蝙蝠TBK1的功能机制尚不明确。

2 材料与方法
研究采用蝙蝠肺细胞系（TB1LU）、人胚肾细胞（293T）和鸡胚成纤维细胞（DF1），通过VSV/NDV病毒感染模型，结合双荧光素酶报告基因、qPCR和Western blot等技术，克隆并分析了^{Tadarida brasiliensis}蝙蝠TBK1的功能。构建了TBK1截短突变体（缺失PKD/ULD/CCD1域），以探究其结构功能关系。

3 结果
3.1 病毒诱导的TBK1上调
VSV感染6-25小时后，蝙蝠TB1LU细胞中TBK1表达显著升高，伴随IFNβ、OAS1等抗病毒基因上调，提示TBK1参与蝙蝠抗病毒应答。

3.2 高度保守的TBK1结构
序列比对显示，蝙蝠TBK1与人类、猪等哺乳动物同源性达90%以上。系统进化树分析表明其与偶蹄目亲缘最近。结构预测显示，PKD（AA9-310）、ULD（AA308-395）和CCD1（AA400-655）构成功能性二聚体。

3.3 跨物种抗病毒功能验证
过表达蝙蝠TBK1可使293T/DF1/TB1LU细胞的IFNβ启动子活性提升4-6倍，并显著抑制NDV复制（病毒载量下降60%）。在蝙蝠细胞中，TBK1还激活了OAS1、MX1等干扰素刺激基因（ISGs）。

3.4 IRF信号轴的关键作用
共表达实验发现，蝙蝠TBK1与IRF1/3/7协同可将IFNβ表达提升至单转染的3倍。特别值得注意的是，即便无病毒感染，TBK1仍能基础性激活IRF3通路，这可能与蝙蝠持续低水平免疫监视的适应性相关。

3.5 结构域的功能不可替代性
缺失PKD、ULD或CCD1任一结构域的TBK1突变体完全丧失激活IFNβ的能力，证实这些区域在磷酸化IRFs、信号复合体组装和亚细胞定位中的核心作用。

4 讨论
该研究首次系统阐明蝙蝠TBK1通过保守的PKD-ULD-CCD1结构域激活IRF1/3/7信号轴，维持基础抗病毒状态。这种机制可能解释蝙蝠为何能平衡病毒控制与免疫耐受——既通过TBK1快速响应病原体，又避免过度炎症反应。未来研究可聚焦蝙蝠TBK1的翻译后修饰或物种特异性互作蛋白，为开发新型抗病毒策略提供靶点。