CPN2通过抑制NF-κB通路调控免疫反应缓解隐睾症的机制研究

这篇研究揭示了羧肽酶N亚基2（CPN2）通过抑制NF-κB信号通路调控免疫炎症反应，从而改善隐睾症（Cryptorchidism）病理进程的分子机制。研究结合转录组学（WGCNA）、机器学习算法（LASSO/SVM/RF）和动物模型（DBP诱导），证实CPN2过表达可减少浆细胞（CD39+/CD326+）浸润，降低炎症因子（IL-6/TNF-α）释放，促进精原干细胞（PLZF+）增殖并抑制凋亡（Bcl-2/Bax比值升高）。该发现为隐睾症的非手术干预提供了新靶点。

　　

免疫炎症反应在隐睾症发病中的关键作用

隐睾症作为男性生殖系统常见畸形，与不育和睾丸癌风险增加密切相关。通过对GEO数据库（GSE16191/GSE25518/GSE149084）的52例样本分析发现，隐睾患者睾丸组织中浆细胞比例显著升高（CIBERSORT分析），同时伴随单核细胞减少。差异基因分析（limma包）鉴定出4208个差异表达基因（DEGs），其中1766个上调、2442个下调，提示免疫微环境失衡是隐睾症的重要特征。

CPN2通过NF-κB通路调控浆细胞活化

加权基因共表达网络分析（WGCNA）显示，蓝色模块基因（131个）与浆细胞浸润呈负相关（r=-0.82）。KEGG富集发现这些基因显著富集于NF-κB信号通路。通过机器学习（LASSO回归、随机森林和SVM-RFE）筛选出核心调控基因CPN2——一种已知具有抗炎潜力的羧肽酶亚基。体外实验证实，CPN2过表达可抑制NF-κB p105/p50蛋白活化，降低浆细胞标志物CD39/CD326表达（Western Blot），并减少炎症因子分泌（ELISA检测IL-6/TNF-α下降47%）。

动物模型验证CPN2的生殖保护效应

采用邻苯二甲酸二丁酯（DBP）诱导的隐睾大鼠模型显示，CPN2过表达组睾丸重量较对照组增加1.8倍，Johnsen评分从4.2升至8.3（反映生精功能改善）。组织学分析显示，CPN2干预后多核生殖细胞减少63%，间质水肿减轻。免疫荧光证实PLZF⁺精原干细胞数量增加2.1倍，而凋亡率（Annexin V/PI流式检测）降低55%。值得注意的是，NF-κB激活剂PMA可逆转这些保护效应，证实CPN2通过该通路发挥作用。

浆细胞-精原干细胞互作机制

Transwell共培养实验发现，CPN2调控的浆细胞条件培养基可使精原干细胞增殖活性（CCK-8 OD₄₅₀值）提高1.5倍，同时凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax比值上升2.3倍。这种旁分泌调控作用被PMA处理所抑制，表明NF-κB介导的炎症微环境直接影响生殖干细胞命运。

临床转化与局限性

该研究首次阐明CPN2/NF-κB轴在隐睾症中的调控网络，为开发靶向免疫微环境的治疗策略提供依据。但DBP模型的病理过程与人类隐睾存在差异，且CPN2是否通过直接结合IκB激酶（IKK）抑制NF-κB仍需进一步验证。未来研究可探索CPN2激动剂在灵长类模型中的疗效，并评估其对其他生殖障碍（如非梗阻性无精症）的潜在作用。