单切片质谱成像联合数字病理技术实现肾淀粉样变性(AL型)的同步检测与分型

本研究创新性地将基质辅助激光解吸电离质谱成像(MALDI-MSI)与数字病理技术(SPADA)相结合，在单张组织切片上实现了肾轻链淀粉样变性(AL amyloidosis)的同步检测与分型。研究证实MALDI-MSI与免疫荧光(IF)分型结果完全一致，与病理学家评估和SPADA算法的检测一致性分别达86.4%和85%，为临床提供了一种非破坏性、高精度的淀粉样变诊断新策略。

　　

背景
肾淀粉样变性的精确分型对制定治疗策略至关重要，特别是与单克隆丙种球蛋白病(MGRS)相关的AL型淀粉样变需采用强化化疗。传统诊断依赖刚果红染色、免疫荧光(IF/IHC)和透射电镜(TEM)，但存在样本消耗大、形态学判断困难等局限。基质辅助激光解吸电离质谱成像(MALDI-MSI)作为一种非破坏性技术，既能保留组织形态学信息，又能通过"淀粉样蛋白指纹"(如血清淀粉样P成分)实现精准检测与分型。

材料与方法
研究纳入15例AL淀粉样变性肾活检样本(10例Bouin固定，5例福尔马林固定)，采用MALDI-MSI分析m/z 700-3000范围内的肽段。通过空间分割算法自动识别淀粉样沉积区域，并与数字病理技术SPADA(基于刚果红荧光分析的自动化检测流程)和病理学家评估进行对比。同时建立包含31种淀粉样指纹肽段和20种轻链特征肽段的靶向列表，用于ALκ/ALλ亚型鉴定。

结果
在肾小球沉积检测中，MALDI-MSI与SPADA和病理学家的符合率分别为85.0%和86.4%。值得注意的是，MALDI-MSI在BFRB#2和BFRB#5病例中检测到更多阳性肾小球，且这些区域确实存在相应的免疫球蛋白轻链信号，提示其可能检测到更早期的淀粉样沉积。在分型方面，MALDI-MSI与IF结果完全一致，包括一例IF显示λ(4+)与κ(2+)共表达的疑难病例(BFRB#10)，质谱分析确认λ肽段(m/z 883.44)信号强度显著高于κ肽段。

讨论
该研究首次证实MALDI-MSI在不同固定条件下(Bouin/福尔马林)的适用性。相较于传统组织学方法依赖刚果红双折射的特性，MALDI-MSI通过检测淀粉样特征蛋白的共定位实现更客观的判读。与SPADA算法的互补性表明，三者联用可使阳性肾小球检出率提高4.1%。对于临床疑难的共沉积病例，质谱技术能提供半定量分析，这对治疗监测具有重要价值。

结论
MALDI-MSI技术可在单张组织切片上同步完成AL淀粉样变性的检测与分型，且与数字病理技术具有良好的兼容性。这种保留组织的多组学分析方法，为精准肾病诊断提供了新范式，特别适用于活检材料有限的病例和疑难分型场景。