意大利北部新调查区白蛉区系与利什曼原虫流行状况：新兴流行病学图景

这篇研究首次报道了意大利北部Bergamo地区存在三种白蛉物种（Phlebotomus perniciosus、P. neglectus和Sergentomyia minuta），并首次在该地区沙蝇和爬行动物宿主中检测到蜥蜴利什曼原虫（Leishmania tarentolae）及婴儿利什曼原虫（L. infantum）DNA。研究通过形态学和分子生物学方法揭示了白蛉物种组成，采用常规PCR和微滴式数字PCR（ddPCR）技术证实了蜥蜴（Podarcis muralis）作为L. tarentolae自然宿主的高感染率（血液样本阳性率97.14%），同时发现沙蝇与爬行动物之间存在复杂的传播途径。该成果为理解利什曼病（CanL/VL）在新兴地区的传播机制提供了关键数据，强调应将非传统媒介（S. minuta）和共生爬行动物纳入流行病学监测体系。

　　

引言

白蛉（Phlebotomine sand flies）作为利什曼原虫（Leishmania spp.）的主要传播媒介，其分布扩张与气候变化和动物迁徙密切相关。意大利北部传统上被视为非流行区，但自20世纪90年代以来，犬利什曼病（CanL）和人类病例的增多提示流行病学格局正在变化。本研究聚焦Bergamo地区，探究白蛉区系组成及利什曼原虫流行状况，特别关注蜥蜴相关利什曼原虫（L. tarentolae）的潜在生态学意义。

材料与方法

采样设计：2019-2023年在Bergamo地区12个城乡站点（包括丘陵、森林边缘和私人庭院）采用粘捕法和光诱法收集白蛉，同步捕获当地常见壁蜥（Podarcis muralis）采集血液、粪便等样本。

物种鉴定：雄性白蛉通过生殖器形态鉴定，雌性通过PCR-RFLP分析。

分子检测：使用ITS-1靶向PCR和ddPCR技术检测白蛉及蜥蜴样本中的利什曼原虫，后者可区分L. tarentolae和L. infantum的kDNA。

系统发育分析：基于ITS-1序列构建最大似然树，比较分离株与全球已知菌株的亲缘关系。

结果

白蛉区系：共捕获679只白蛉，包括P. perniciosus（31.25%阳性率）、P. neglectus（16.67%阳性率）和S. minuta（20.71%阳性率）。

蜥蜴感染：蜥蜴血液中L. tarentolae的ddPCR阳性率达97.14%，且首次在组织样本和泄殖腔拭子中检出DNA。血液涂片观察到疑似前鞭毛体和无鞭毛体形态。

共感染现象：7只白蛉同时携带L. tarentolae和L. infantum，蜥蜴血液中L. infantum检出率为8.57%。

系统发育：意大利北部分离株与地中海地区L. tarentolae聚为一支，支持其分类地位。

讨论

传播循环：S. minuta表现出严格的嗜蜥蜴性（42.6%血餐来源为壁蜥），而P. perniciosus和P. neglectus可能通过多宿主吸血参与L. tarentolae传播。蜥蜴的高感染率提示其作为重要储存宿主，可能通过白蛉叮咬或捕食途径感染。

公共卫生意义：L. infantum在白蛉和蜥蜴中的检出与当地犬病例空间重叠，需警惕爬行动物作为"哨兵宿主"的预警作用。L. tarentolae虽被认为对哺乳动物无害，但其与致病种的共存可能通过免疫调节影响疾病进程。

结论

本研究揭示了意大利北部利什曼原虫传播的新生态位，强调在监测中整合非传统媒介和宿主的重要性，为区域性疾病防控提供科学依据。