靶向Wnt与DNAJB6/MRJ调控环路：抗呼吸道合胞病毒(RSV)的双重干预新策略

本研究针对呼吸道合胞病毒(RSV)缺乏有效疗法的难题，揭示了分子伴侣DNAJB6/MRJ的长亚型(MRJ-L)通过Wnt信号通路调控RSV复制的关键机制。研究人员发现抑制Wnt信号可显著降低RSV mRNA和基因组合成，并意外发现Wnt抑制剂通过上调CstF64减少MRJ-L表达，形成正向调控环路。该研究首次提出同时靶向Wnt信号和MRJ-L的联合抗病毒策略，为开发广谱抗RSV药物提供了新靶点。

　　

呼吸道合胞病毒(RSV)是全球婴幼儿下呼吸道感染的主要病原体，每年造成约3%的5岁以下儿童住院治疗。尽管近期预防性疫苗和单克隆抗体取得进展，临床仍缺乏特效治疗药物。传统抗病毒策略多靶向病毒自身蛋白，但病毒的高突变率易导致耐药性产生。在此背景下，台湾大学医学院等机构的研究人员另辟蹊径，将目光投向宿主因子——分子伴侣DNAJB6（又称MRJ）及其调控网络。这项发表于《Virology》的研究首次揭示MRJ长亚型(MRJ-L)与Wnt信号通路形成正反馈环路促进RSV复制，为开发宿主靶向抗病毒药物提供了全新视角。

研究团队采用RNA-seq转录组分析、基因集富集分析(GSEA)和RT-qPCR验证发现MRJ-L敲除显著下调WNT6/10A/11等配体表达，同时上调DACT1/CXXC4等Wnt负调控因子。通过Wnt分泌抑制剂Wnt-C59处理实验，结合免疫印迹、噬斑试验和形态学观察，证实抑制Wnt信号可剂量依赖性降低RSV蛋白表达、病毒载量和合胞体形成。尤为关键的是，研究发现Wnt-C59通过上调3'端切割刺激因子CstF64，促使MRJ基因从长亚型(MRJ-L)向短亚型(MRJ-S)转换，意外揭示了Wnt-MRJ-L的正向调控环路。最终通过联合使用MRJ-L吗啉代寡核苷酸(MoMRJ)与Wnt-C59，证实双重靶向策略可协同抑制RSV复制。

MRJ-L敲除影响Wnt信号
RNA-seq分析显示MRJ-L缺失导致Wnt配体表达下调而抑制因子表达上调，RT-qPCR验证WNT6/10A/11表达降低2-4倍，DACT1/CXXC4上调3-5倍。值得注意的是，经典Wnt靶标COX2表达量下降6.7倍，提示MRJ-L对Wnt通路具有正向调控作用。

抑制Wnt信号减少RSV增殖
使用porcupine抑制剂Wnt-C59（IC₅₀=20μM）处理HEp-2细胞，5μM剂量即可使RSV N蛋白表达降低70%，病毒滴度下降80%。同步观察到病毒诱导的细胞融合现象显著缓解，表明Wnt抑制影响RSV生命周期多个环节。

Wnt-C59调控MRJ亚型转换
机制研究发现Wnt-C59处理使CstF64蛋白水平增加2-3倍，导致MRJ-L mRNA比例从80%降至40%，相应蛋白水平下降60%。这一发现在未感染细胞中同样成立，证实Wnt-MRJ调控环路独立于病毒存在。

双重靶向展现协同效应
联合应用MoMRJ（靶向MRJ-L）与Wnt-C59使RSV N RNA水平较单药处理进一步降低30-40%，病毒滴度检测显示相似协同趋势，证实双重干预策略的科学合理性。

该研究创新性地描绘了"Wnt-CstF64-MRJ-L"调控轴在RSV感染中的核心地位：在单核细胞向巨噬细胞分化过程中，Wnt信号激活会抑制CstF64表达，促进MRJ-L生成，从而创造有利于RSV复制的细胞内环境。这一发现不仅解释了为何巨噬细胞比单核细胞更易感RSV，更重要的是揭示了宿主因子与信号通路的互作网络可作为"广谱抗病毒靶点"。相较于传统病毒靶向药物，这种靶向宿主因子的策略可能产生更持久的抗病毒效果且不易诱发耐药性。研究提出的Wnt-MRJ双重抑制策略，为开发抗RSV及其他依赖Wnt信号的RNA病毒（如流感病毒、SARS-CoV-2）药物提供了新思路。未来研究需在类器官模型和动物实验中验证该策略的有效性和安全性，并深入解析Wnt信号调控CstF64表达的具体分子机制。