双靶向N-PMIplus@CA纳米平台通过协同抑制MDM2/β-catenin通路治疗p53野生型肺腺癌的转化研究

针对p53野生型肺腺癌(LUAD)中MDM2介导的p53功能抑制与Wnt/β-catenin通路代偿激活的临床难题，研究人员开发了自组装纳米颗粒N-PMIplus@CA，通过EPR效应和巨胞饮作用实现MDM2抑制肽与β-catenin拮抗剂(CA)的协同递送。该双靶向策略在细胞和动物模型中显著恢复p53功能、抑制肿瘤增殖并促进凋亡，为克服单药治疗耐药性提供了新范式。

　　

肺腺癌作为非小细胞肺癌的主要亚型，其治疗面临严峻挑战——尽管约60%患者保留野生型p53，但MDM2蛋白的过度表达会持续降解这个"基因组守护者"，而Wnt/β-catenin通路的代偿性激活又为肿瘤细胞提供了逃生通道。这种双重打击使得传统单靶点药物屡屡受挫，亟需能同时封锁两条关键通路的创新疗法。

在这项发表于《Materials Today Bio》的研究中，国内研究人员设计了一种名为N-PMI^plus@CA的智能纳米平台。该平台通过精妙的分子工程，将优化后的MDM2抑制肽与β-catenin拮抗剂——迷迭香酸(CA)整合到自组装纳米颗粒中。研究团队采用TCGA数据库分析验证靶点关联性，通过分子动力学模拟指导纳米颗粒设计，并综合运用皮下/原位移植瘤模型评估疗效。关键技术包括：基于EPR效应和巨胞饮作用的肿瘤靶向递送系统、荧光偏振法验证肽-MDM2结合活性、RNA测序解析通路调控网络，以及系统的急性/亚急性毒性评价体系。

2.1 靶点协同机制验证
通过TCGA-LUAD队列分析发现，MDM2高表达与Wnt通路激活显著相关，且双阳性患者预后最差。在MDM2过表达的Lewis肺癌(LLC)模型中，β-catenin水平异常升高而p53被抑制，证实两条通路存在交叉调控。

2.2 纳米平台构建
设计的N-PMI^plus复合肽包含β-catenin H1螺旋结构域和MDM2拮抗肽，通过二硫键稳定结构。分子模拟显示其与MDM2结合自由能达-9.8 kcal/mol，等温滴定量热法证实CA结合能力。自组装形成的100 nm颗粒具有正电性(ζ电位+28.4 mV)，利于肿瘤细胞摄取。

2.3 体外抗肿瘤效应
流式细胞术显示N-PMI^plus@CA主要通过巨胞饮途径内化，48小时诱导超过50%细胞凋亡。Western blot证实其可同步下调MDM2/β-catenin表达，使p53水平恢复3.2倍，cyclin D1降低67%。

2.4 皮下瘤模型疗效
在MDM2过表达的移植瘤中，N-PMI^plus@CA组肿瘤抑制率(TGI)达91%，显著优于单药组。免疫组化显示Ki67阳性率下降82%，TUNEL阳性细胞增加5倍，且主要器官无毒性。

2.5 原位模型验证
静脉移植模型再现了肺癌微环境特征，N-PMI^plus@CA使肺结节数减少76%，双靶点抑制效果与皮下模型一致。10倍剂量下仍无造血系统或肝肾功能异常。

这项研究开创性地通过纳米技术解决了MDM2与Wnt抑制剂联用的药代动力学难题。N-PMI^plus@CA的独特优势在于：① 通过结构优化实现"一载体双靶点"的精准递送；② 利用肿瘤微环境特性增强富集；③ 规避了传统联合疗法的毒性叠加问题。其临床转化价值不仅限于肺腺癌，更为p53野生型恶性肿瘤的靶向治疗提供了可扩展的技术平台。未来研究需在PDX模型和灵长类动物中进一步验证长效安全性，并探索与免疫检查点抑制剂的联用策略。