CRISPR-Cas9基因编辑小鼠原代CAR T细胞的制备及其在肿瘤免疫治疗中的应用研究

【编辑推荐】为解决免疫缺陷小鼠模型无法模拟人体免疫微环境的难题，研究人员开发了CRISPR-Cas9编辑原代小鼠CAR T细胞的新方案。该技术通过电转核糖核蛋白复合体（RNP）和磁珠激活，在5-6天内完成基因敲除CAR T细胞的制备，为在免疫健全模型中研究肿瘤微环境（TME）对CAR T细胞功能的影响提供了重要工具。

　　

利用CRISPR-Cas9基因编辑技术改造嵌合抗原受体（CAR）T细胞已成为提升抗肿瘤功能和安全性的常规策略。虽然免疫缺陷小鼠异种移植模型常用于评估人类CAR T细胞功能，但其缺乏功能性免疫系统的缺陷导致无法模拟患者体内免疫抑制性肿瘤微环境（TME）等关键屏障。

为此，研究人员开发了一套针对小鼠原代T细胞的CRISPR-Cas9编辑方案。该技术首先通过电穿孔递送核糖核蛋白复合体（RNP），配合磁珠激活完成T细胞转染；随后进行CAR基因转导和细胞扩增；最终验证基因敲除效率及编辑后CAR T细胞功能。整个流程耗时约5-6天，可无缝整合至标准小鼠CAR T细胞制备流程中。

这项技术突破使得研究人员能够在免疫健全的动物模型中，精确探究特定基因缺失对CAR T细胞在天然TME中功能的影响。该方案要求操作者具备无菌细胞培养技术和T细胞生物学基础，其成功建立将为癌症免疫治疗及相关领域带来广泛的应用前景。