人源肝细胞大规模扩增及3D培养与基因编辑技术的应用研究

为解决供体短缺导致的原代人肝细胞(PHHs)来源受限问题，研究人员开发了一套完整的技术方案：通过大规模扩增获得增殖型人肝细胞(ProliHHs)，建立3D培养再成熟体系，并实现CRISPR-Cas9介导的基因编辑。该技术为肝细胞治疗、类器官疾病建模和药物筛选提供了重要工具。

　　

这项技术方案详细阐述了从健康供体和遗传性肝病患者获取原代人肝细胞(PHHs)后，进行大规模扩增获得增殖型人肝细胞(ProliHHs)的全过程。通过1-2个月的体外扩增，这些细胞可在8天内建立三维(3D)培养体系实现功能再成熟。更令人振奋的是，研究人员成功开发了基于慢病毒转导和CRISPR-Cas9基因编辑技术的操作流程，仅需3天即可完成基因敲除(knockout)和敲入(knock-in)操作。该技术突破解决了肝细胞来源匮乏的瓶颈问题，为肝病治疗、药物开发和疾病模型构建提供了革命性的研究工具，特别适用于需要基因修饰的个性化医疗研究。整套方案设计严谨，具有良好可重复性，适合具备基础科研背景的人员操作实施。