DIRAS2通过RAF/MEK/MAPK通路促进口腔白斑细胞增殖的机制研究

本研究针对口腔白斑（OLK）恶性转化机制不明的问题，通过检测DIRAS2在OLK组织的异常表达，构建DIRAS2flox/flox条件敲除小鼠模型，结合4NQO诱导的癌前病变实验，首次揭示DIRAS2通过激活RAF/MEK/MAPK信号通路促进细胞增殖的分子机制，为OLK的早期干预提供新靶点。

　　

口腔白斑（OLK）作为最常见的口腔潜在恶性病变，其恶性转化率高达1%-40%，尤其伴随重度上皮 dysplasia（异常增生）时风险显著升高。然而，正常口腔黏膜向癌前病变转化的分子机制尚未阐明。DIRAS2作为Ras超家族成员，虽在部分肿瘤中发挥抑癌作用，但其在OLK中的功能仍属未知。更关键的是，MAPK信号通路（包含MAP4K/MAP3K/MAP2K/MAPK级联反应）作为调控细胞增殖的核心通路，是否受DIRAS2调控进而影响OLK进展，成为亟待解决的科学问题。

为回答这些问题，首都医科大学附属北京口腔医院的研究团队开展了一项系统性研究。他们发现DIRAS2在OLK组织中异常高表达，并通过构建上皮特异性DIRAS2条件敲除小鼠（采用Cre-LoxP系统与K14-Cre小鼠杂交），结合4NQO化学诱导模型，首次证实DIRAS2缺失可显著抑制舌 precancerous lesions（癌前病变）进展。相关成果发表在《Tissue and Cell》上，为OLK的靶向干预提供了理论依据。

研究主要采用四项关键技术：1）免疫组化检测10例OLK患者配对样本中DIRAS2表达；2）CRISPR/Cas9构建DIRAS2^flox/flox小鼠并与K14-Cre小鼠杂交获得上皮特异性敲除模型；3）4NQO诱导小鼠舌癌前病变模拟OLK进展；4）Western blot分析MAPK通路蛋白表达。

DIRAS2在人类口腔白斑组织中高表达

免疫组化显示DIRAS2主要定位于基底层和棘层细胞质，OLK组织表达量显著高于正常黏膜（P<0.05），提示其可能参与OLK发生。

DIRAS2促进OLK细胞体外增殖

构建DIRAS2 knockdown（敲低）的人 dysplastic oral keratinocyte（异常增生口腔角质细胞）后，细胞增殖能力下降，同时RAF/MEK/MAPK通路蛋白表达降低。

上皮DIRAS2缺失抑制小鼠舌癌前病变

4NQO诱导的DIRAS2条件敲除小鼠舌病变进展减缓，组织学显示上皮 dysplasia程度减轻，且MAPK通路活性受抑，与体外实验结果一致。

讨论与意义

该研究首次阐明DIRAS2通过RAF/MEK/ERK信号级联（包含RAF1、MEK1/2、ERK1/2等关键激酶）促进OLK细胞增殖的分子机制。临床样本与动物模型的相互验证，不仅解释了DIRAS2作为Ras家族新成员在癌前病变中的促增殖功能，更揭示了MAPK通路在OLK恶性转化中的核心作用。特别值得注意的是，上皮特异性基因敲除策略精准模拟了DIRAS2在口腔黏膜中的生物学效应，为后续靶向治疗研究奠定基础。这些发现不仅拓展了对Ras超家族功能多样性的认知，更为OLK的早期分子诊断和通路靶向拦截提供了潜在新策略。