PTPN2 rs1893217风险等位基因通过JAK-STAT-CEACAM6轴增强AIEC侵袭：IBD易感宿主的新机制与治疗靶点

本文揭示了IBD易感基因PTPN2 rs1893217风险等位基因通过JAK-STAT信号通路上调CEACAM6表达，促进致病性黏附侵袭性大肠杆菌（AIEC）定植的分子机制。研究通过CRISPR-Cas9构建PTPN2基因编辑细胞模型，证实JAK抑制剂托法替尼（tofacitinib）可逆转CEACAM6过表达并限制AIEC侵袭，为携带PTPN2变异的IBD患者提供了精准治疗依据。

　　

ABSTRACT
炎症性肠病（IBD）患者常出现肠道致病菌黏附侵袭性大肠杆菌（AIEC）的扩增。研究发现，IBD易感基因蛋白酪氨酸磷酸酶2型（PTPN2）功能缺失会导致肠道菌群失调，而Ptpn2敲除（Ptpn2-KO）小鼠表现出AIEC扩增。CEACAM6是一种宿主细胞表面糖蛋白，被AIEC利用以附着和进入肠上皮细胞（IECs）。本研究探讨了IECs中PTPN2如何限制AIEC侵袭。

GRAPHICAL ABSTRACT
通过BioRender创建的图形摘要展示了PTPN2缺失导致CEACAM6上调及AIEC侵袭的机制。

Introduction
IBD包括克罗恩病（CD）和溃疡性结肠炎（UC），是一种慢性复发性胃肠道炎症性疾病。GWAS研究已鉴定出240多个与IBD相关的基因，其中PTPN2 rs1893217 SNP与多种慢性炎症性疾病相关。PTPN2是JAK-STAT通路的负调控因子，其表达受促炎细胞因子IFN-γ和IL-6上调。此外，IBD患者的微生物组成改变（菌群失调）与AIEC扩增相关。

Materials and methods
研究使用HT-29和Caco-2BBe IEC细胞系，通过CRISPR-Cas9构建PTPN2 rs1893217 SNP插入（PTPN2-KI）和完全敲除（PTPN2-KO）模型。通过RNA测序、Western blot和免疫荧光分析CEACAM6表达。细菌感染实验使用人类IBD AIEC分离株LF82和荧光标记的小鼠AIEC（mAIEC^red）。JAK-STAT信号通过IL-6和泛JAK抑制剂托法替尼（tofacitinib）调控。

Results

1. PTPN2 rs1893217 SNP和上皮PTPN2敲低促进CEACAM6表达
   IBD患者中携带PTPN2 rs1893217 SNP（CT/CC）的结肠活检显示CEACAM6表达升高。RNA测序显示PTPN2-KD HT-29细胞中CEACAM6 mRNA和蛋白水平显著增加。

2. 上皮PTPN2缺失增加对AIEC侵袭的易感性
   PTPN2-KI和KO Caco-2BBe细胞中CEACAM6表达显著升高，且AIEC LF82和mAIEC^red的侵袭增加。抗CEACAM6抗体可阻断AIEC侵袭。

3. IL-6在PTPN2缺陷IECs中促进CEACAM6表达
   IL-6处理进一步增加PTPN2-KI和KO细胞中CEACAM6表达，STAT1和STAT3沉默部分降低CEACAM6水平。

4. 托法替尼挽救CEACAM6过表达并限制AIEC侵袭
   托法替尼处理降低PTPN2缺陷细胞中CEACAM6表达和AIEC侵袭，但对PTPN2-WT细胞影响较小。

Discussion
本研究阐明PTPN2通过JAK-STAT-CEACAM6轴限制AIEC侵袭的机制，并提出托法替尼作为携带PTPN2变异IBD患者的潜在治疗策略。未来研究将探索CEACAM6调控的其他通路及JAK抑制剂的精准应用。