CDX2缺失通过促进结直肠癌细胞迁移和肿瘤出芽增强侵袭性：机制与临床意义

本研究针对结直肠癌(CRC)中CDX2表达缺失与肿瘤侵袭性增强的关联展开深入探索。研究人员通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建CDX2敲除模型，结合患者样本和PDX模型，首次证实CDX2缺失通过下调E-cadherin促进EMT（上皮-间质转化），显著增强癌细胞迁移能力和肿瘤出芽(TB)频率。该发现为CDX2作为抑制CRC转移的关键靶点提供了直接证据，对高风险患者的临床分层具有重要价值。

　　

在结直肠癌的临床治疗中，约20%的患者会出现CDX2蛋白表达缺失，这类患者往往预后较差且易发生转移。肿瘤前沿那些脱离主瘤体的"出芽细胞"(Tumor Budding, TB)正是转移的先锋部队，它们不仅CDX2表达低下，还表现出EMT特征。但CDX2如何调控这一恶性进程？瑞士伯尔尼大学的研究团队在《Scientific Reports》发表的研究给出了答案。

研究团队采用多维度技术验证：通过CRISPR/Cas9构建LS174T和CaCo2细胞的CDX2敲除模型，利用CRISPR/dCas9 SAM系统激活HT29/SW620细胞的内源CDX2；采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验模拟体内侵袭；对临床样本和PDX模型进行多重免疫荧光(mIF)定量分析。

CDX2缺失增强癌细胞迁移和侵袭
基因编辑实验显示，CDX2敲除使癌细胞迁移能力提升3倍（p<0.001），侵袭性增加2.5倍。值得注意的是，通过FLAG标签回补CDX2可完全逆转该表型。

内源CDX2激活抑制转移
利用CRISPR-SAM系统激活CDX2后，HT29细胞的迁移能力下降60%（p<0.05），且呈现剂量依赖性。这表明CDX2对转移的抑制具有定量调控特征。

CDX2-E-cadherin轴调控肿瘤出芽
mIF分析揭示：在患者肿瘤出芽区域，CDX2和E-cadherin表达量较主瘤体分别降低82%和76%（p<0.0001）。PDX模型中该现象在转移灶中重现，证实CDX2通过维持上皮特性抑制出芽。

3D模型验证侵袭表型
CAM实验显示CDX2敲除细胞在鸡胚中形成更多出芽结构（p<0.01），且呈现不规则浸润边缘，模拟了临床观察到的侵袭模式。

这项研究首次建立CDX2-E-cadherin-EMT的调控轴，阐明CDX2缺失通过促进上皮特性丢失驱动肿瘤出芽的分子机制。其创新性在于：①采用基因编辑实现CDX2表达的精准调控；②通过PDX模型模拟人类转移微环境；③开发mIF技术实现多标记共定位分析。这些发现为CDX2缺失患者的靶向治疗提供了理论依据，CAM模型的应用也为抗转移药物筛选提供了新平台。未来研究可进一步探索CDX2表观遗传沉默的具体机制及其与微环境互作的关系。