DHX34缺失通过dsRNA介导的I型干扰素通路激活触发肝细胞癌肿瘤内源性免疫

肝癌免疫逃逸机制一直是肿瘤治疗的重大挑战。西安交通大学研究人员发现RNA解旋酶DHX34通过调控异常RNA降解抑制肿瘤免疫原性，其缺失可导致dsRNA积累并激活RIG-I/MAVS/IRF3通路，触发I型干扰素(IFN-I)反应和CD8+ T细胞活化。该研究发表于《Neoplasia》，为肝癌免疫治疗提供了新靶点。

　　

肿瘤免疫治疗面临的核心难题是"冷肿瘤"如何获得免疫原性。肝细胞癌(HCC)作为典型的免疫豁免型肿瘤，常通过破坏肿瘤微环境(TME)中免疫细胞的识别能力实现逃逸。近年研究发现，RNA代谢异常与肿瘤免疫密切相关，但RNA解旋酶家族成员DHX34在HCC免疫调控中的作用仍是未解之谜。西安交通大学第二附属医院的研究团队在《Neoplasia》发表的重要成果，揭示了DHX34通过调控双链RNA(dsRNA)稳态抑制I型干扰素(IFN-I)通路的新机制，为破解肝癌免疫抵抗提供了理论突破。

研究采用多组学联用策略，关键技术包括：基于TCGA和GEO数据库的生物信息学分析；CRISPR/Cas9构建DHX34基因敲除(KO)的HepG2和Hepa1-6细胞系；c-Myc/Alb-Cre诱导的自发性肝癌小鼠模型；流式细胞术检测CD8⁺ T细胞亚群；RNA测序(RNA-seq)和基因集富集分析(GSEA)；dsRNA特异性免疫荧光染色(J2抗体)等。研究纳入5例未接受放化疗的HCC患者手术标本进行验证。

DHX34与CD8⁺ T细胞浸润呈负相关
通过分析TCGA-LIHC和GSE6764数据集，发现DHX34在HCC中高表达且与不良预后相关。ssGSEA显示DHX34^low组富集CD8⁺效应T细胞，而免疫检查点PD-L1表达与DHX34呈正相关。临床样本验证DHX34与CD8A表达负相关。

DHX34缺失抑制免疫健全宿主的肿瘤生长
CRISPR构建的DHX34-KO细胞在裸鼠中无生长差异，但在人源化C-NKG小鼠(接种HepG2+PBMC)和C57BL/6小鼠(Hepa1-6模型)中显著抑制肿瘤。c-Myc驱动的DHX34^cKO小鼠肝癌重量减轻41.7%。

DHX34缺陷增强CD8⁺ T细胞活化
流式分析显示DHX34-KO肿瘤中CD8⁺IFN-γ⁺和CD8⁺GZMB⁺ T细胞比例增加2.3倍，PD-1表达降低60%。自发肝癌模型中效应记忆T细胞(CD8⁺CD44⁺CD62L^-)增加3.1倍。

DHX34缺失激活I型干扰素通路
RNA-seq鉴定463个差异基因，GO分析显示IFN-α/β信号通路显著激活。Western blot证实MAVS、p-IRF3和p-IKK表达上调。RNase III处理可逆转IFN-α升高和IRF3磷酸化，证实dsRNA积累是关键触发因素。

DHX34过表达抑制免疫通路
过表达组RNA-seq显示2012个基因差异表达，KEGG分析发现趋化因子通路下调。蛋白检测显示TBK1/IKK/IRF3磷酸化水平降低，证实DHX34负调控RLR信号通路。

这项研究首次阐明DHX34通过"RNA解旋酶-dsRNA-RIG-I/MAVS-IFN-I-CD8⁺ T细胞"轴调控HCC免疫监视的完整机制。不同于已知的ADAR1或DDX3X作用模式，DHX34作为NMD(无义介导的mRNA降解)通路成员，其缺失导致的dsRNA积累具有独特免疫激活特性。临床意义在于：DHX34低表达患者生存期更长，且与"热肿瘤"特征相关，提示其可作为预测免疫治疗响应的生物标志物；靶向DHX34可能通过诱导"病毒模拟"状态克服PD-1耐药，为联合免疫治疗提供新策略。研究也存在局限性，如dsRNA具体来源(内源性逆转录病毒或双向转录产物)仍需阐明。该发现拓展了RNA代谢调控肿瘤免疫的认知边界，为开发基于RNA免疫原性的抗癌药物奠定基础。