靶向RBPJ增强诱导性调节性T细胞稳定性与功能：突破自身免疫疾病治疗的新策略

本研究针对诱导性调节性T细胞（iTreg）稳定性不足的临床难题，通过CRISPR筛选发现转录因子RBPJ是FOXP3表达的负调控因子。德国团队利用icRNA-seq、inChIP-seq等创新技术证实，RBPJ敲除可提升iTreg的免疫抑制功能并改善移植物抗宿主病模型小鼠生存率，为自身免疫疾病细胞疗法提供新靶点。

　　

在免疫系统的精密调控网络中，调节性T细胞（Treg）如同"和平卫士"，通过表达关键转录因子FOXP3维持对自身抗原的耐受性。然而，当这些细胞功能失调时，便会引发类风湿性关节炎、1型糖尿病等自身免疫疾病风暴。目前，通过体外诱导产生的调节性T细胞（iTreg）虽在治疗中展现出潜力，却面临稳定性不足的致命缺陷——在炎症环境中易失去FOXP3表达而"叛变"为致病性T细胞。这一瓶颈严重制约了细胞疗法的临床应用。

德国研究团队的Chen等人在《Nature》发表的突破性成果（后由Beumer和Delacher在《Signal Transduction and Targeted Therapy》评述）揭开了这一难题的冰山一角。他们发现重组信号结合蛋白（RBPJ）竟是隐藏在iTreg细胞中的"稳定性破坏者"。这个通常参与Notch信号通路的分子，在非激活状态下会与核受体共抑制因子（NCOR1/2）、组蛋白去乙酰化酶3（HDAC3）组成"抑制联盟"，直接结合FOXP3启动子区域，通过增加DNA甲基化、降低组蛋白乙酰化等表观遗传机制压制FOXP3表达。

为攻克这一难题，研究者开发了三项核心技术：基于CRISPR的全基因组筛选锁定RBPJ为关键靶点；创新的细胞内测序技术（icRNA-seq、inChIP-seq、inATAC-seq）实现单细胞多组学分析；人源化小鼠移植物抗宿主病（GvHD）模型验证治疗潜力。这些方法犹如"分子显微镜"，首次清晰捕捉到RBPJ对iTreg稳定性的动态调控过程。

关键研究发现

1. CRISPR筛选揭示RBPJ的负调控作用
   通过全基因组CRISPR筛选发现，靶向RBPJ的向导RNA显著提升FOXP3表达水平。在TGF-β诱导的iTreg中，RBPJ敲除使FOXP3蛋白增加2倍，且这种效应独立于经典Notch信号通路。

2. 表观遗传调控机制解析
   

   
   
   RBPJ缺失导致FOXP3基因关键增强子CNS2区域DNA甲基化降低50%，组蛋白H3乙酰化水平提升3倍。染色质可及性分析显示，RBPJ敲除使FOXP3启动子区域形成更开放的染色质结构。

3. 功能验证与治疗潜力
   在炎症环境（含TNF-α）中，RBPJ敲除iTreg维持FOXP3表达的能力较野生型提高80%。GvHD模型显示，输注RBPJ缺陷iTreg的小鼠60天生存率达75%，与天然Treg（nTreg）疗效相当，且显著抑制效应T细胞增殖。

研究启示与展望
该研究不仅阐明RBPJ-NCOR-HDAC3复合物是iTreg稳定性的"分子刹车"，更开创性地提出表观遗传重编程可优化细胞疗法。值得注意的是，小鼠模型中Rbpj缺失曾报道有促炎效应，而本研究在人源系统发现相反作用，提示物种差异可能影响临床转化。未来需在更多自身免疫模型（如狼疮、糖尿病）中验证RBPJ靶向策略，并探索小分子抑制剂替代基因编辑的可行性。

这项成果犹如为细胞疗法装上了"稳定性导航"，其意义远超单一靶点发现——研究者建立的CRISPR筛选数据集还包含数十个潜在FOXP3调控因子，为后续研究埋下更多线索。正如评论所述，这项工作标志着我们向"设计下一代智能免疫细胞"的目标迈出了关键一步。