基于噬菌体展示技术的共生微生物免疫原性蛋白鉴定新策略

本研究针对宿主-微生物互作中免疫原性抗原鉴定的难题，来自未知机构的研究人员开发了基于M13噬菌体展示的抗体/抗原淘选技术。通过构建ORFeome噬菌体文库，结合多轮免疫沉淀及ELISA/ELISPOT验证，实现了对共生菌和病原体免疫原性蛋白的高效鉴定，为解析黏膜免疫和系统免疫应答机制提供了重要工具。

　　这项突破性研究建立了系统性鉴定共生微生物免疫原性蛋白的创新流程。通过巧妙利用M13噬菌体展示技术，研究人员首先构建包含全部开放阅读框的ORFeome噬菌体文库，随后采用抗体介导的亲和淘选（biopanning）进行多轮免疫沉淀筛选。鉴定出的候选抗原可通过酶联免疫吸附试验（ELISA）、酶联免疫斑点技术（ELISPOT）以及B细胞四聚体生成等金标准方法进行验证。该方案特别优化了针对黏膜免疫关键效应分子IgA和循环抗体IgG的检测灵敏度，不仅能从血清抗体库中筛选抗原，还可直接利用肠道分泌型抗体进行淘选。经单克隆噬菌体分离后，仅需桑格测序即可精确锁定抗原表位区域，甚至达到蛋白结构域级别的分辨率。整套技术方案可在数周内完成，为揭示宿主-共生菌互作的分子机制提供了高效研究工具，对理解黏膜屏障免疫和系统性免疫应答具有重要价值。