综述：硫化氢检测的最新进展与未来展望：荧光法作为一种多功能生物物理方法

（编辑推荐）本综述系统总结了H2 S荧光探针的设计策略（如还原机制、亲核加成反应）与创新应用（比率型/双光子探针），强调其在活体实时监测、细胞成像及疾病研究（如心血管疾病、神经退行性疾病）中的价值，同时指出选择性、生物相容性等挑战，为H2 S生物学研究提供重要方法论参考。

　　

Abstract
硫化氢(H₂
S)作为关键气体信号分子，参与血管舒张、神经传递和抗炎反应等生理过程。荧光探针凭借高灵敏度、特异性和实时监测能力，成为研究H₂
S生物学的核心工具。最新开发的比率型探针通过双波长校准减少环境干扰，而双光子探针利用长波激发实现深层组织成像。多功能探针可同步检测H₂
S与活性氧等分子，为复杂生物系统研究提供新视角。

Introduction
内源性H₂
S由胱硫醚β-合成酶(CBS)、胱硫醚γ-裂解酶(CSE)等酶催化生成，其浓度动态变化与疾病密切相关。传统检测方法如气相色谱存在侵入性缺陷，而基于亲核加成或硫键断裂机制的荧光探针，通过特异性化学反应实现活细胞成像。例如，将探针的叠氮基团还原为氨基可产生显著荧光增强，该反应对H₂
S具有高度选择性。

Fluorophore selection
近红外(NIR)荧光团因组织穿透性强成为首选，如花菁类染料。探针设计需平衡斯托克斯位移与量子产率，同时避免生物自发荧光干扰。最新研究将聚集诱导发光(AIE)材料应用于探针开发，显著提升信噪比。

Advancements in detection
比率型探针通过发射峰比值量化H₂
S浓度，有效校正探针分布不均的影响。靶向线粒体的TP-Mito系列探针揭示了H₂
S在能量代谢中的调控作用。此外，结合质谱技术的杂交探针实现了从定性到定量的跨越。

Challenges and future directions
当前探针仍面临硫醇类化合物交叉反应的干扰问题。通过引入计算辅助设计（如分子对接模拟）可优化探针特异性。下一代探针或将整合CRISPR-Cas9系统实现基因表达与H₂
S水平的关联分析。

Conclusion
荧光探针技术已推动H₂
S从毒性分子到治疗靶点的认知转变。随着超分辨成像技术的融合，未来有望在阿尔茨海默病淀粉样蛋白沉积与H₂
S缺失的关联研究中取得突破。