TNNT3基因新型隐性致病变异导致先天性肌病的多组学鉴定及临床表型拓展

本研究通过多组学联合分析，在两名先天性肌病(CM)伴远端关节弯曲的姐妹患者中，发现TNNT3基因新型纯合内含子变异c.67+128G>A，经RNA测序证实其剪接异常效应。该研究不仅拓展了TNNT3相关CM的等位基因谱，首次报道内含子变异致病机制，还通过长期随访揭示该病可呈现非进行性转归特征，为临床诊断提供新思路。

　　

在肌肉收缩的精密调控机制中，肌钙蛋白复合体扮演着核心角色。作为其重要组分，快骨骼肌肌钙蛋白T（TNNT3）的基因变异已知会导致远端关节弯曲，但隐性遗传模式引起的先天性肌病（CM）却极为罕见——全球仅有两例报道。更令人困惑的是，既往病例均显示严重表型，而临床实践中可能存在未被识别的轻型患者。这种认知缺口使得部分CM病例成为"诊断黑洞"，亟需创新方法破解遗传谜题。

英国大奥蒙德街医院联合多国团队在《Neuromuscular Disorders》发表的研究，通过整合全外显子测序（WES）、全基因组测序（WGS）和肌肉组织RNA测序（RNASeq），首次鉴定出TNNT3基因新型内含子变异c.67+128G>A的致病性。该变异导致外显子异常剪接，在两名非近亲婚配夫妇所生的姐妹患者中引发非进行性CM，其临床特征包括出生时肌张力低下、近端肌无力伴手指挛缩，但随年龄增长症状显著改善。

研究采用三重技术路线：首先对22个CM相关基因进行靶向测序（阴性结果），随后开展家系WES/WGS发现TNNT3纯合变异，最终通过患者肌肉RNASeq确认变异引起10个核苷酸的异常剪接插入。肌肉活检显示快肌纤维萎缩、肌原纤维紊乱及局灶性线状体，但超微结构损伤程度轻于既往病例。

【临床发现】
两姐妹（P1/P2）出生即出现典型CM表现：P1产前即存在胎动减少和钟形胸，出生后需鼻饲喂养；P2虽症状较轻但仍存在肌无力。随访至青少年期，二者运动功能显著改善，P1可独立行走，P2甚至能参与体育活动。这种良性病程与既往报道的严重表型形成鲜明对比。

【遗传分析】
WES/WGS锁定TNNT3第1内含子c.67+128G>A变异，家系验证符合隐性遗传模式。RNASeq证实该变异导致外显子1异常延伸，产生截短蛋白（p.Gly23Valfs*15）。值得注意的是，该变异在人群数据库中的等位基因频率达0.3%，提示可能存在未被诊断的轻型患者群体。

【讨论与意义】
该研究突破性发现体现在三方面：首先，拓展了TNNT3相关CM的分子机制谱系——这是首个被证实的内含子致病变异；其次，揭示了疾病表型变异性，为遗传咨询提供重要参考；最后，建立了多组学技术联用的诊断范式，特别强调RNASeq在验证非编码变异中的关键作用。研究还提出TNNT3双等位基因变异可能通过干扰快肌纤维发育而非直接破坏肌节结构导致疾病，这为理解肌钙蛋白功能开辟了新视角。

这项研究不仅为CM诊断难题提供解决方案，更启示临床对于内含子变异和非典型病程患者的关注。正如作者指出，在基因组时代，整合转录组数据将成为破解"阴性结果"病例的必备工具。而TNNT3相关CM表型谱的拓展，也将促使临床医生重新审视这类"温和型"肌病的识别与管理策略。