综述：CRISPR碱基编辑器的发展与工程化历程：经验与启示

（编辑推荐）这篇综述系统梳理了CRISPR碱基编辑器（BEs）的研发历程，聚焦蛋白工程视角下的技术突破与挑战，涵盖传统胞嘧啶/腺嘌呤编辑器（CBEs/ABEs）、新型TadA衍生CBEs、颠换BEs及无CRISPR系统BEs等前沿进展，为精准基因组编辑领域提供重要参考。

　　

Summary

CRISPR碱基编辑器（BEs）作为不依赖DNA双链断裂的精准基因组编辑工具，开启了核苷酸水平修饰的新纪元。其发展历程虽短暂却成果丰硕，不仅奠定了碱基编辑技术的基础，更为未来蛋白工程提供了宝贵案例。

技术演进与分类

传统CBEs与ABEs通过融合CRISPR-Cas9与脱氨酶实现C•G→T•A或A•T→G•C的转换。而新型TadA衍生CBEs通过工程化大肠杆菌tRNA腺苷脱氨酶（TadA）拓展了编辑范围。更具突破性的颠换BEs（如C→G编辑器）和双碱基编辑器（同时实现C→T与A→G）则进一步丰富了编辑工具箱。值得注意的是，CRISPR-free BEs通过替代引导系统（如PUF结构域）实现了非CRISPR依赖的靶向编辑。

工程化挑战与突破

编辑效率与精准度的平衡始终是核心难题。脱氨酶优化（如APOBEC1的理性设计）、Cas蛋白变体筛选（如nickase-Cas9）及连接肽改造显著提升了编辑性能。此外，编辑窗口的精确控制（通过UGI融合策略）和脱靶效应的抑制（如高保真Cas变体）成为技术迭代的关键。

应用前景与局限

尽管BEs在疾病模型构建（如点突变校正）和农业育种中展现潜力，其递送效率、大片段编辑能力及复杂基因组环境的适应性仍需突破。未来方向可能聚焦于新型脱氨酶挖掘、编辑范围拓展（如表观遗传标记编辑）以及体内递送系统的优化。

（注：全文严格基于原文内容缩编，未添加外部信息）