高效多重体细胞基因组编辑：基于Cas12a转基因小鼠的复杂疾病模型构建新策略

来自国际团队的研究人员通过构建可调控表达enhanced Acidaminococcus sp. Cas12a（enAsCas12a）的转基因小鼠，开发了能够实现多重体细胞基因组编辑的创新平台。该研究利用模块化CRISPR RNA（crRNA）阵列结合克隆条形码技术，成功解析了肿瘤抑制基因三重敲除组合的适应性规律，为复杂基因互作研究提供了高效工具。

　　

科学家们成功培育出具有Cre调控型和组成型表达enhanced Acidaminococcus sp. Cas12a（enAsCas12a）的转基因小鼠，这种新型工具能在体内高效实现多重基因组编辑。通过创新的模块化CRISPR RNA（crRNA）阵列设计，研究人员不仅构建了包含三种肿瘤抑制基因同时失活的复合基因型肿瘤模型，还模拟了致癌染色体易位事件。

研究团队巧妙地将克隆条形码技术整合到四向导RNA（guide RNA）阵列中，定量分析了不同引导RNA数量和排列位置对肿瘤形成数量及大小的影响。更有趣的是，当系统性地敲除九种肿瘤抑制基因的所有可能组合时，发现三重敲除基因型的适应性特征主要可由单基因和双基因效应的叠加来解释。

这项突破性工作为快速构建复杂疾病模型提供了全新解决方案，其采用的Cas12a等位基因技术将极大推动体内基因组多重变异的高通量研究，特别是在解析癌症等复杂疾病的基因互作网络方面具有重要价值。