基于Ki-67指数10%临界值的胰腺神经内分泌肿瘤分层研究：临床病理与分子多组学分析

胰腺神经内分泌肿瘤（PanNETs）的预后评估亟需更精准的分子标志物。日本静冈癌症中心团队通过整合临床病理特征与多组学分析（WES/CCP/GEP），验证了Ki-67指数10%作为G2分级新阈值的临床价值。研究发现G2-high（Ki-67 10-20%）组较G2-low（3-10%）组具有更高的肿瘤突变负荷（TMB）、更多驱动基因突变（如DAXX/ATRX）及SERPINA1等癌基因上调，其5年无复发生存率显著降低（66% vs 97%）。该研究为PanNETs精准分级提供了分子依据，支持ESMO指南推荐的10%阈值治疗策略。

　　

胰腺神经内分泌肿瘤（PanNETs）虽然常被归类为低度恶性肿瘤，但部分患者仍会出现远处转移或复发，这给临床预后评估带来巨大挑战。目前世界卫生组织（WHO）分级系统采用Ki-67指数3%和20%作为G1/G2/G3的分界值，但越来越多的证据表明，这种划分可能无法充分反映肿瘤的生物学异质性。特别是在G2群体中（Ki-67 3-20%），患者的临床结局差异显著，亟需更精细的分层标准。欧洲肿瘤内科学会（ESMO）临床实践指南已前瞻性地提出将10%作为治疗决策的关键阈值，但这一建议缺乏系统的分子生物学证据支持。

为了破解这一临床难题，静冈癌症中心的研究团队开展了一项创新性研究。他们收集了87例手术切除的PanNETs病例，在WHO传统分级基础上引入10%的Ki-67新阈值，将患者分为G1（<3%）、G2-low（3-10%）、G2-high（10-20%）和G3（>20%）四组。通过整合临床病理特征分析与多组学技术（包括全外显子测序WES、综合癌症panel深度测序CCP和基因表达谱GEP），研究团队首次从分子层面揭示了10%阈值背后的生物学基础。这项重要研究成果发表在《Scientific Reports》期刊，为PanNETs的精准医疗提供了新的理论依据。

研究采用了多项关键技术：1）对87例手术标本进行Ki-67免疫组化定量（MIB1抗体）和SSTR2（生长抑素受体2）表达检测；2）选取19例代表性样本进行WES和CCP测序（平均深度分别为134.9×和1173.7×），分析体细胞突变和拷贝数变异（CNV）；3）对17例样本进行全基因组表达谱（GEP）芯片分析；4）通过qRT-PCR验证关键基因表达差异（如SERPINA1）；5）采用Kaplan-Meier法和Cox回归模型评估临床预后。

在"Clinicopathological and immunohistochemical data"部分，研究发现四组患者在肿瘤直径（G2-low 20mm vs G2-high 39mm，p=0.013）、神经侵犯（9% vs 44%，p=0.008）和复发率（3% vs 31%，p=0.011）等方面存在显著差异。多因素分析证实四组分类是无复发生存（RFS）的独立预测因子。

"Somatic mutations and germline variants"结果显示，Ki-67≥10%组（G3/G2-high）的肿瘤突变负荷显著增高（中位数2 vs 0，p=0.036），且富含驱动基因突变：包括染色质重塑基因DAXX/ATRX的截短突变（见于G2-high病例）、mTOR通路相关基因（PTEN/TSC1）突变以及TP53等抑癌基因异常。这些突变与不良预后密切相关，如携带DAXX突变的G2-high病例均出现复发。

"Comprehensive gene expression analysis"通过聚类分析发现：Cluster 1（在Ki-67≥10%组上调）包含BIRC5、CDH12等促癌基因，其中SERPINA1（丝氨酸蛋白酶抑制剂）经qRT-PCR验证显著高表达（p<0.05）；Cluster 2（在Ki-67<10%组上调）富含AZGP1等抑癌基因；Cluster 3则包含PNLIP等正常胰岛功能基因，其在低级别肿瘤中保留表达提示分化程度更高。

这项研究通过多组学交叉验证，确立了Ki-67指数10%作为PanNETs分子分界点的科学依据：1）临床层面，G2-high组表现出与G3更接近的侵袭特征（大肿瘤直径、高转移率），其5年总生存率（88%）显著低于G2-low组（96%）；2）分子层面，10%阈值区分出两种生物学亚型——低突变负荷的"惰性型"（G1/G2-low）和高突变负荷的"进展型"（G2-high/G3），后者具有ALT通路异常（DAXX/ATRX缺失）和致癌基因激活（如SERPINA1）等特征。这些发现不仅支持ESMO治疗指南中10%阈值的临床应用，还为开发针对高危患者的靶向治疗（如针对mTOR通路或SERPINA1的抑制剂）提供了新思路。未来需要扩大样本量验证这些分子标志物的预测价值，并探索它们在液体活检中的应用潜力。