CRISPR/Cas12a荧光生物传感器系统研究：高灵敏特异性单核苷酸变异检测新策略

为解决单核苷酸变异(SNV)在野生型DNA背景下的精准检测难题，研究人员开发了基于CRISPR/Cas12a的荧光生物传感器系统。通过筛选crRNA中0-19位碱基替换位点，发现中间位置可显著提升特异性，并验证分子信标(MB)报告体系能有效提高区分度。该技术成功应用于SARS-CoV-2 D614G/N501Y突变检测，为病原体关键突变监测提供可视化解决方案。

　　

精准检测单核苷酸变异(SNV)对病原体诊断和药物响应预测至关重要。针对SARS-CoV-2变异株(如D614G和N501Y)的高传染性特征，研究者创新性地将CRISPR/Cas12a系统与三种荧光报告体系(ssDNA/dsDNA/MB)联用。通过系统性扫描crRNA的0-19位点，发现中间位置碱基替换可双重提升理论特异性和实验效率。分子信标(MB)报告系统展现出优异的突变区分能力，其设计巧妙的发夹结构能放大信号差异。更令人振奋的是，在crRNA上引入额外突变位点可进一步强化特异性，而侧流层析试纸条的开发则实现了检测结果的可视化判读。该技术已成功应用于奥密克戎变异株的临床样本检测，展现出"分子剪刀"CRISPR系统在突变监测领域的巨大潜力，其模块化设计更为未来新变异株的快速检测预留了升级空间。