编辑推荐：
缺血性脑卒中致死致残率高，再灌注损伤是临床难题。小胶质细胞在神经炎症和神经保护中具双重作用。本研究通过单细胞和 bulk RNA 测序，发现 CD74 在小胶质细胞中上调，靶向敲除可减少梗死体积、炎症因子及神经功能缺损，为脑卒中治疗提供新方向。
脑卒中是威胁人类健康的 “头号杀手”，其中缺血性脑卒中占比超 80%。尽管现代医学发展出血管内取栓和静脉溶栓等治疗手段，但再灌注后引发的脑组织二次损伤（如神经炎症、血脑屏障破坏）仍难以有效控制，导致患者预后不佳。小胶质细胞作为中枢神经系统的 “免疫哨兵”，在缺血性脑卒中中呈现 “双刃剑” 特性：过度激活时释放肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）、白细胞介素 - 1β（IL-1β）等促炎因子加剧神经毒性，而适当激活又可通过吞噬凋亡细胞、促进神经重塑等发挥保护作用。如何精准调控小胶质细胞的功能平衡，成为破解缺血性脑损伤治疗瓶颈的关键。
在此背景下，苏州大学附属第一医院联合卒中研究所的研究团队，针对小胶质细胞在脑缺血再灌注损伤中的作用机制展开深入研究。团队通过多组学技术和动物模型实验，揭示了细胞分化抗原 74（CD74）在小胶质细胞介导的神经炎症中的关键作用，相关成果发表于《Molecular Brain》。
研究团队采用两项核心技术开展工作：一是利用公共数据库中的小鼠脑缺血再灌注（MCAO/R）模型单细胞 RNA 测序（scRNA-seq，GSE174574）数据，分析缺血半球小胶质细胞的基因表达异质性；二是结合流式分选小胶质细胞的 bulk RNA 测序（GSE190171）数据，通过整合分析筛选关键基因。同时，构建 CX3CR1Cre/ERT2 小鼠特异性敲除小胶质细胞 CD74，结合 TTC 染色、免疫荧光、ELISA、qRT-PCR 及行为学检测（如转棒试验、黏附去除试验、旷场试验），系统评估 CD74 缺失对脑损伤和神经功能的影响。
小胶质细胞转录组特征与 CD74 筛选
通过 scRNA-seq 分析发现，MCAO/R 模型小鼠缺血半球小胶质细胞在 1 天后出现显著转录组变化，与假手术组相比鉴定出差异表达基因。结合 bulk RNA-seq 数据，两组共筛选出 57 个重叠差异基因，GO 富集分析显示这些基因富集于炎症反应调控、白细胞迁移等通路，其中 CD74 在神经炎症通路中差异最显著。单细胞数据显示 CD74 mRNA 在小胶质细胞中表达量显著升高，免疫荧光证实 CD74 蛋白在缺血半暗带区小胶质细胞中特异性上调，且与小胶质细胞活化标志物 Iba1 共定位，提示 CD74 可能参与小胶质细胞促炎表型调控。
CD74 敲除减轻脑缺血再灌注损伤
利用 CX3CR1Cre/ERT2 小鼠和腺相关病毒（AAV）系统，特异性敲除小胶质细胞 CD74 后，TTC 染色显示 MCAO/R 小鼠梗死体积较对照组显著缩小，Western blot 和免疫荧光验证了 CD74 的有效敲低。ELISA 结果表明，敲除组脑内 TNF-α、IL-1β、IL-6 等促炎因子水平显著降低，证实 CD74 缺失可抑制小胶质细胞促炎反应。
CD74 缺失改善长期神经功能
行为学评估显示，CD74 敲除小鼠在转棒试验中跌落潜伏期延长，黏附去除试验中接触和去除胶带时间缩短，表明运动协调和感觉功能改善。旷场试验中，敲除组小鼠运动速度、总距离增加，中央区停留时间和进入次数增多，提示探索行为增强、焦虑样行为减少，证实 CD74 敲除对长期神经功能恢复的促进作用。
研究结论与意义
本研究首次揭示 CD74 是小胶质细胞促炎表型的关键调控因子，其通过驱动 TNF-α、IL-1β 等炎症介质释放加剧脑缺血再灌注损伤。靶向敲除小胶质细胞 CD74 可显著减轻梗死体积、抑制神经炎症，并改善运动、感觉和认知功能。该发现不仅拓展了小胶质细胞在脑卒中中作用机制的认知，更提供了以 CD74 为靶点的潜在治疗策略，为开发抗缺血性脑损伤药物开辟了新方向。尽管研究基于小鼠模型，其转化价值仍需临床验证，但 CD74 有望成为连接基础研究与临床治疗的关键分子桥梁，为脑卒中精准医疗提供新靶点。
研究通过多组学整合与功能验证，系统阐明了 CD74 在小胶质细胞调控中的核心地位，为缺血性脑卒中治疗提供了创新思路。未来进一步探索 CD74 下游信号通路（如 MIF-CD74 轴）及在人类样本中的表达特征，将为该靶点的临床转化奠定更坚实的基础。
