揭秘水稻垩白调控新机制:CHALK10-SD1-GA 模块的关键作用

【字体: 时间:2025年05月11日 来源:Plant Communications 9.4

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  在水稻研究中,垩白问题影响稻米品质,为探究其调控机制,研究人员开展了关于 CHALK10 基因功能的研究。结果发现 CHALK10 通过调节 SD1 的泛素化降解影响 GA 水平和淀粉代谢,进而调控垩白。该研究为改善水稻品质提供了新方向。

  在水稻的世界里,垩白现象就像是隐藏在稻谷中的 “瑕疵”,极大地影响了水稻的品质。稻谷本应晶莹剔透,可一旦出现垩白,不仅外观大打折扣,口感和加工性能也会受到影响,降低了其商业价值。长久以来,虽然科研人员已经知道淀粉合成异常、胚乳发育缺陷等因素与垩白形成有关,但垩白形成的分子机制仍迷雾重重,尤其是 F-box 蛋白在其中扮演的角色,更是知之甚少。而且,植物激素赤霉素(GA)对水稻生长发育有多方面影响,可它是否参与垩白调控,一直是个未解之谜。在这样的背景下,为了揭开水稻垩白的神秘面纱,中国水稻研究所的研究人员踏上了探索之旅。
研究人员从一个经乙基甲烷磺酸(EMS)诱变的水稻突变体库中,筛选出了 chalk10 突变体,这个突变体的垩白粒率和垩白度都明显增加。随后,研究人员运用多种技术深入研究,最终发现了一个全新的调控水稻垩白的机制,即 CHALK10-SD1-GA 模块。该研究成果发表在《Plant Communications》上,为水稻品质改良提供了关键的理论依据。

在研究过程中,研究人员运用了多种关键技术。首先,通过 MutMap 方法精准定位到 CHALK10 基因。接着,利用 CRISPR/Cas9 基因编辑技术构建相关突变体,验证基因功能。此外,还采用酵母双杂交(Y2H)、谷胱甘肽 S - 转移酶(GST)pull-down、荧光素酶互补成像(LCI)等技术,探究蛋白质之间的相互作用。

研究结果如下:

  • chalk10 突变体的特征:chalk10 突变体的胚乳发育存在缺陷,淀粉颗粒呈球形且松散堆积,垩白粒率和垩白度显著升高,同时淀粉含量和理化性质发生改变,如总淀粉和直链淀粉含量降低,凝胶一致性变长等。
  • CHALK10 基因的鉴定与功能验证:运用 MutMap 方法定位到 CHALK10 基因,其编码一个 F-box 蛋白。通过互补实验和基因编辑敲除实验证实,该基因对垩白形成和正常淀粉合成至关重要。
  • CHALK10 与 SD1 的相互作用:Y2H 筛选发现 CHALK10 与 GA 20 - 氧化酶 SD1 相互作用,且 F-box 结构域介导了这种相互作用。多种实验,如 GST pull-down、LCI、双分子荧光互补(BiFC)和免疫共沉淀(Co-IP)等,在体内外都验证了这一相互作用。
  • CHALK10 对 SD1 的调控机制:CHALK10 可与 OSK1、CUL1 和 RBX1 形成 SCF 复合物,通过 26S 蛋白酶体途径促进 SD1 的泛素化和降解。在 chalk10 突变体中,SD1 积累,GA 含量上升。
  • SD1 对垩白的影响:构建 SD1 过表达(SD1-OE)转基因株系和 SD1 功能缺失突变体发现,SD1 是垩白的正调控因子,其过表达会导致垩白粒率和垩白度增加,而功能缺失则降低垩白度。
  • GA 对垩白的影响:用 GA3处理野生型水稻,随着 GA3浓度增加,垩白粒率和垩白度上升,总淀粉和直链淀粉含量下降。这表明 GA 在 CHALK10 下游促进垩白形成。
  • CHALK10-SD1 模块对淀粉代谢的影响:在 chalk10 突变体、SD1-OE 株系和 GA3处理的植株中,α- 淀粉酶活性和淀粉降解相关基因表达增加,而淀粉合成相关基因表达减少,导致淀粉含量降低,可代谢糖积累。

研究结论表明,在野生型水稻中,CHALK10 通过形成 SCF 复合物降解 SD1,维持 GA 生物合成和淀粉代谢的平衡。而在 chalk10 突变体中,SD1 不能正常降解,GA 水平上升,影响淀粉代谢相关基因表达,最终导致垩白形成。

在讨论部分,研究人员指出,虽然已经揭示了 CHALK10-SD1-GA 模块调控垩白的机制,但仍有一些问题有待进一步研究。例如,自噬在 SD1 降解中的具体作用机制尚不明确。此外,该研究为水稻品质改良提供了新的靶点和理论基础,有助于培育出低垩白、高品质的水稻品种,对水稻育种具有重要的指导意义。未来,科研人员可以基于此研究,进一步探索垩白调控的复杂网络,为提升水稻品质持续发力。

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