综述：单细胞RNA测序在人视网膜类器官研究中的应用

这篇综述系统阐述了单细胞RNA测序（scRNA-seq）技术在视网膜类器官（ROs）研究中的突破性应用。通过解析ROs的细胞异质性、发育轨迹及疾病分子特征，揭示了其在视网膜神经发生、退行性疾病（如AMD、青光眼）研究中的价值，并探讨了与空间转录组学、CRISPR筛选等技术的整合前景，为视网膜疾病治疗提供新思路。

　　

scRNA-seq数据验证ROs与正常人视网膜的相似性
视网膜类器官（ROs）作为潜在的移植来源，其形态与功能需高度模拟生理状态视网膜。scRNA-seq通过解析细胞组成差异，证实ROs能复现视网膜关键细胞类型（如光感受器前体细胞PCPs）的基因表达谱，尤其在发育中后期与体内视网膜相似度显著提升。

ROs中scRNA-seq研究的主要细胞类型
光感受器细胞（视杆/视锥细胞）及其前体PCPs、穆勒胶质细胞（MGs）是scRNA-seq分析的核心靶点。研究发现ROs中视杆细胞标记基因NRL⁺和视锥细胞标记基因THRB⁺的表达动态，揭示了光感受器分化的关键时间窗口。

ROs的疾病研究应用
在年龄相关性黄斑变性（AMD）模型中，scRNA-seq发现视网膜色素上皮（RPE）细胞中补体通路异常激活；糖尿病视网膜病变研究则通过ROs鉴定出血管内皮生长因子（VEGF）信号通路的细胞特异性调控机制。

技术优化与平台整合
Cell X机器人培养平台联合scRNA-seq验证了自动化RO培养的批次稳定性。此外，微流控芯片与单细胞多组学技术的结合，显著提升了ROs在药物筛选（如抗青光眼化合物）中的效率。

挑战与展望
当前ROs培养仍存在周期长（>120天）、成本高等瓶颈。未来需通过CRISPR-scRNA-seq联用精准编辑疾病相关基因（如HTRA1^rs11200638），并建立患者特异性ROs库以推动个性化治疗。空间转录组学的引入将进一步提升ROs的微环境模拟精度。