马齿苋叶片中oleraceins的定性定量分析及其抗氧化潜力研究

本研究针对马齿苋(Portulaca oleracea)叶片中独特多酚生物碱oleraceins的提取优化与功能评价问题，通过LC-ESI/HRMSn技术筛选出富含oleraceins的水浸提物，鉴定出3种新型oleraceins（α、γ、δ），并证实其通过清除自由基和激活Nrf2通路发挥抗氧化作用，为开发基于马齿苋的膳食补充剂提供了科学依据。

　　

在地中海和亚洲饮食中，马齿苋(Portulaca oleracea)因其清脆口感和丰富营养备受青睐。这种野生草本植物不仅含有高价值的多元不饱和脂肪酸(PUFA)，更富含一类结构特殊的环多巴胺多酚生物碱——oleraceins。近年研究发现，oleraceins具有超越维生素C和E的抗氧化能力，其神经保护作用在帕金森病模型中显示出独特价值。然而，这类成分的提取方法优化、结构多样性及其作用机制仍存在研究空白。

针对这些问题，来自国内某大学的研究团队在《Current Research in Food Science》发表了创新性成果。研究人员通过系统比较不同"绿色"提取方法，发现水浸提法能高效富集oleraceins，并运用LC-ESI/HRMSⁿ技术鉴定出14种oleraceins，其中oleracein α、γ、δ为首次报道。定量分析显示oleracein A含量最高（445 mg/100g干重）。功能实验证实，oleracein富集组分具有显著自由基清除能力（TEAC值2.05 mg/mL），其酸水解产物能激活细胞抗氧化防御关键转录因子Nrf2（核因子E2相关因子2）通路，为马齿苋的保健应用提供了分子层面的证据。

关键技术方法包括：1）采用不同极性溶剂（乙醇/水混合物、水浸提、煎煮）制备提取物；2）基于C18固相萃取柱的oleracein富集；3）LC-ESI/HRMSⁿ负离子模式定性分析；4）LC-ESI/QTrap/MS/MS多反应监测(MRM)定量；5）TEAC和DPPH自由基清除实验；6）HepG2-ARE/NRF2-luc报告基因系统评估Nrf2激活。植物样本采自意大利那不勒斯Gragnano地区的自然种群。

研究结果部分：
3.1节揭示水浸提法对oleraceins的选择性最佳，质谱特征碎片（如m/z 340.0817的环多巴胺阴离子）证实新型oleraceins α（C₃₀H₃₅O₁₆N）、γ（三糖基化结构）和δ（含非糖苷化阿魏酰基）的存在。

3.2节显示oleracein富集组分的抗氧化活性显著高于粗提物（DPPH IC₅₀ 149.32 μg/mL），其酸水解产物通过α,β-不饱和羰基与Keap1（Kelch样ECH关联蛋白1）结合，使Nrf2通路激活达4倍（p<0.0001）。

3.3节通过建立MRM检测方法，定量发现oleracein A、B、Q分别占干重的0.45%、0.17%和0.11%，构成马齿苋抗氧化活性的物质基础。

该研究首次系统阐明了马齿苋水浸提物中oleraceins的化学多样性，突破性地发现其可通过"直接清除自由基"和"激活Nrf2介导的细胞防御"双途径发挥抗氧化作用。特别值得注意的是，oleracein糖苷因极性限制难以穿透细胞膜，而水解后的苷元能有效诱导抗氧化酶表达，这一发现为开发针对氧化应激相关疾病（如神经退行性疾病）的功能食品提供了新思路。研究建立的LC-MRM-MS定量方法为马齿苋质量控制提供了可靠手段，而发现的3种新型oleraceins则丰富了植物特殊代谢物的结构数据库。从传统食用植物中挖掘出具有明确作用机制的活性成分，体现了"药食同源"理念在现代营养学研究中的重要价值。