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这篇综述聚焦宫颈癌治疗难题，探讨针对人乳头瘤病毒（HPV）的 E6 和 E7 癌蛋白的治疗策略。涵盖治疗性疫苗、免疫疗法、基因治疗及新型化合物等，为开发更有效的宫颈癌治疗方法提供了全面且有价值的参考。
引言
宫颈癌是全球女性癌症相关死亡的第四大原因，2020 年有 341,831 人死亡，604,127 例新发病例。人乳头瘤病毒（HPV）持续感染是主要病因，其中高危型 HPV 的 16、18 型导致约 80% 的宫颈癌 。HPV 基因组早期区域的 E6 和 E7 蛋白，通过抑制肿瘤抑制基因 p53 和视网膜母细胞瘤蛋白（pRb）的功能，促进宫颈癌发生。目前宫颈癌治疗手段包括手术、化疗和放疗，但存在副作用大、易产生耐药性等问题，5 年生存率未明显改善，因此需要开发新的治疗策略。
治疗性疫苗
- 核酸疫苗：DNA 疫苗因安全性、热稳定性和低成本成为潜在策略，多以 E6 和 E7 为靶点，但免疫原性低。研究发现联合 MDA-7/IL-24 细胞因子、使用轮状病毒非结构蛋白 4（NSP4）作佐剂或与免疫检查点阻断剂联用可增强疗效 。mRNA 疫苗也有应用，通过密码子优化可提高蛋白表达，抑制肿瘤生长。
- 肽疫苗：肽疫苗诱导细胞介导免疫，基于免疫信息学设计抗原肽可提高疗效，但存在与主要组织相容性复合体（MHC）结合受限和免疫反应不理想的问题。使用 Toll 样受体配体作佐剂或联合抗 PD-1 抗体治疗可克服这些问题。
- 载体疫苗：以减毒流感病毒、腺病毒、单核细胞增生李斯特菌等为载体构建的疫苗，可引发显著的体液和细胞免疫反应，抑制肿瘤生长，延长小鼠生存期。
- 细胞疫苗：将表达 HPV-16 E6/E7 癌基因的小鼠肺上皮细胞，经工程化表达粒细胞 - 巨噬细胞集落刺激因子后制成细胞疫苗，给小鼠预先接种破伤风类毒素可增强免疫反应。
新型免疫治疗策略
- 抗体：单链可变抗体片段（ScFvs）和单克隆抗体可靶向 E6 和 E7 蛋白。研究显示，针对 HPV 16 的 E6 和 E7 的 ScFvs 和单克隆抗体能显著延缓肿瘤进展，细胞外囊泡（EVs）可作为 ScFvs 的递送载体 。单域抗体也有潜力，但需进一步研究。
- T 细胞疗法：T 细胞受体基因工程 T 细胞疗法（TCR-T）以 E6 和 E7 为靶点，研究筛选出理想的抗原表位，生成的 T 细胞能杀伤肿瘤细胞系。
- 亲和体：亲和体（Affibodies）能特异性结合靶分子。针对 HPV 16 E7 的 ZHPV16E7384 和针对 E6 的 ZHPV16E61235 可抑制癌细胞增殖，联合使用效果更佳。将亲和体转化为亲和毒素可增强抗肿瘤效果，此外，蜂毒和小肽 CIGB-300 也有抑制 E6 和 E7 的作用。
基因治疗
- 合成 RNA 疗法：包括反义 RNA（asRNA）、小干扰 RNA（siRNA）和短发夹 RNA（shRNA），通过 RNA 干扰机制降解靶蛋白的 mRNA，抑制基因表达。shRNA 所需浓度低、脱靶效应小、基因沉默时间长，腺相关病毒（AAV）等可作为其递送载体 。siRNA 可与多种递送系统联用，与化疗、放疗联合有协同效果。
- 微小 RNA：微小 RNA（miRNA）参与宫颈癌发病各阶段，分为致癌 miRNA 和抑癌 miRNA。抑制致癌 miR-18a 可恢复相关通路功能，抑制宫颈细胞增殖；过表达抑癌 miR-331 - 3p 可下调 E6/E7 表达，抑制细胞增殖。
- CRISPR 技术：CRISPR/Cas9 系统可切割靶基因 DNA 序列，抑制 E6 和 E7 表达，病毒和非病毒载体均可用于递送 。CRISPR 激活（CRISPRa）可在不引入突变的情况下激活肿瘤抑制基因 p53，抑制癌细胞增殖，但对 E6 蛋白水平的影响有待研究。
新型化合物
- 化学药剂：多种化学和药理化合物对宫颈癌有抗癌活性，如三氧化二砷可诱导宫颈癌细胞凋亡，Cpd12 可增强化疗药物的细胞毒性，联合治疗往往效果更好。
- 植物提取物：从植物中提取的化合物可靶向 E6 和 E7 蛋白或相关信号通路。纳米颗粒制剂或与化疗药物联用可增强其疗效，如姜黄素、白藜芦醇等，均能下调 E6 和 E7 表达，诱导癌细胞凋亡。
- 微生物提取物：核糖核酸酶 Binnase 可增加 HPV 16 阳性宫颈癌细胞凋亡，下调 E6/E7 表达，联合干扰素（IFNα2b）可提高疗效 。海洋链球菌的 N - 乙酰 - 去甲酰抗霉素 A（NADA）和乳酸杆菌培养上清液也能降解 E6 和 E7 蛋白。
结论与展望
宫颈癌危害严重，预防性疫苗对已感染患者无效，且在低收入国家难以普及。现有治疗手段副作用大，因此针对 E6/E7 蛋白开发新疗法至关重要。目前治疗性 DNA 疫苗、合成 RNA 疗法和 CRISPR 技术展现出良好前景，未来有望为宫颈癌治疗带来突破，改善患者预后。
